花生2s清蛋白组成和部分蛋白功能研究

来源 :华南师范大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jrff1
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
本文利用双向电泳技术对花生2s清蛋白的组成成分进行分析,由于2s清蛋白各组分的丰度不同,将蛋白按分子量大小分成三个组分,分别作为目的蛋白进行分离条件优化。条件优化主要在三个方面进行:在第一向方面,分别用不同长度和pI范围的预制胶条进行等点聚焦;在第二向方面,用不同浓度的的分离胶进行蛋白分离;另外一方面通过调整蛋白的上样量来优化分离效果。   得到的结论是:1.对于小分子量的蛋白组分(10~25KD),选择pI4~7,7 cm的线性预制胶条,一向等点聚焦20,000伏时,10%和16%夹层胶Tricine-SDS-PAGE的二向分离系统,此方法对小分子量蛋白组分的分离效果最好,分离出12.5% SDS-PAGE不能分离出的蛋白点。2.对于中间分子量的蛋白(25~50KD),选择pI5~8,24 cm线性预制胶条,一向等点聚焦90,000伏时,12.5% SDS-PAGE二向分离胶,蛋白上样量2.0 mg,分离效果最好。3.对于大分子量的蛋白(50~70KD),选择pI3~10,17 cm非线性预制胶条,一向等点聚焦65,000伏时,13.5% SDS-PAGE二向分离胶,蛋白上样量1.5 mg,得到较为理想的双向电泳图。   将凝胶上分子量17~23KD,等电点在pI5.6~5.9的6个成对排列的蛋白点命名为腹肌样(abdominal muscle like,AML)蛋白。通过和其他研究者的双向电泳结果的比较分析,证实AML蛋白在花生蛋白组中稳定存在,可作为判断双向电泳的重复性和稳定性的标志性蛋白点。   以肺腺癌A549细胞为作用对象,对2s蛋白中部分蛋白组分的功能进行研究。原核表达2s-5b蛋白,2s-5b蛋白是花生2s蛋白中的一个亚基,用其处理肺腺癌A549细胞,结果发现其对癌细胞的增殖没有抑制作用。   构建2s-4b蛋白的真核表达载体,转染肺腺癌A549细胞,应用光学倒置显微镜,苏木素-伊红染色进行用形态学观察,MTT法检测其对癌细胞的增殖的作用。结果显示其不能促进癌细胞凋亡,而抑制增殖作用不明显。
其他文献
自适应传输技术可以根据实时的信道状态调整数据传输速率,使得数据传输参数与当前的信道状态动态匹配,是提高时变的无线信道利用率的有效技术。本文针对长时延的卫星信道,设
立松和平是日本当代知名作家,以关注社会、描摹现实著称.他的“边界线意识”着眼于日本经济高速成长时期的种种社会问题,尝试从整体出发消解人与自然、都市与村镇、个体与社
年画是我国极具本土特色的传统绘画艺术,其产生于民间,发展于民间,并表现出了明显的社会文化的思想性与时代性.基于此,文章从审美特点、题材选择等方面入手,对清代、清末民初
光敏色素(Phytochrome,PHY)是植物感受外界环境变化的重要光受体,它在植物的生长发育具有重要的调控作用。光敏色素A(PHYA)是高等植物中第一个被发现的光敏色素,调节连续远红光
一、杂志介绍《大观》由河南省开封东京文学文化传媒有限公司主办,河南省文化产业研究会协办,河南省开封市文学艺术界联合会主管,国内统一刊号为CN41-1431/J,国际标准刊号为I
期刊
自19世纪末20世纪初西方现代美术发展起来至今,美术的流派风格趋于多样化.西方现代绘画艺术早期最伟大的革新就是抛弃了自文艺复兴以来的绘画科学技术的运用和对“自然的模仿
路易斯·布尔乔亚(Louise Bourgeois)是20世纪伟大的女性艺术家之一,同时,她也是艺术史上长寿的一位艺术家(1911—2010年),由此,她的艺术生涯跨度近一个世纪.然而,直到20世纪
目前无线通信领域飞速发展,多种通信标准共存,这就要求通信设备朝着多频化方向发展,特别地,频率可调谐的多频微波滤波器能根据实际需要调谐到所需的频段,单个多频可调滤波器
董其昌是明末书法家、画家兼理论家.他的画以笔墨变化为主,有高雅闲逸之趣,运用枯笔和水墨相结合的技法、没骨或浅绛两种风格,简淡中带有清幽、静雅的感觉.同时,董其昌对禅宗
曾我萧白是一位日本江户时期的画家,在一幅《鹰图》的题款中,曾我萧白透露了自己的身世——“明大(太)祖皇帝十四世玄孙”.原来,曾我萧白是定居日本的中国皇族画家.他的花鸟