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目的:应用免疫组化技术探讨不同处理方法对大鼠局灶性脑缺血损伤后脑组织内源性神经干细胞的再生及分布规律的影响。 方法:选用成年雄性Wistar大鼠,应用开颅法烧灼闭塞大脑中动脉,制作局灶性脑缺血损伤动物模型。动物随机分为正常组、假手术组和缺血组,缺血组又分为手十二井穴放血组、中药Y腹腔注射组、环孢菌素A腹腔注射组、对照组等四组。大鼠脑缺血7天后取脑并制作冰冻切片,进行苏木素及甲苯胺蓝染色,观察脑组织病理学变化;进行nestin、BrdU、PCNA、GFAP、NSE等免疫组织化学染色。 结果: 手十二井穴放血组与神经再生和神经元相关的BrdU、nestin和NSE的免疫组化染色结果显示免疫阳性细胞主要分布于缺血区皮质部分,阳性细胞数明显多于对照组(P<0.05)。中药Y腹腔注射组与神经再生和神经元相关的BrdU、nestin和NSE的免疫组化染色结果显示免疫阳性细胞主要分布于缺血区皮质部分,阳性细胞数明显多于对照组(P<0.05)。环孢菌素A腹腔注射组的免疫组织化学染色阳性细胞数与对照组相比没有明显差异。 结论: 1.手十二井穴放血法对大鼠脑缺血后中枢神经的再生修复以及对神经元的保护作用比较明显。 2.中药Y抑制了星形胶质细胞反应,从而缓解了胶质瘢痕的形成。可能促进胶质细胞分泌神经生长因子,对脑缺血后中枢神经干细胞的增殖有促进作用。 3.脑缺血后中枢神经干细胞增殖的启动与细胞免疫无明显相关性。 虽然通过我们的实验发现了手十二井血放血疗法和中药Y对脑缺血后的中枢神经干细胞的增殖能起到一定作用,但还有很多问题有待解决。如,考虑观察手十二井穴放血组和中药Y组的成熟神经元标志,以确定神经新生后终末分化成的神经细胞的性质。并以各种神经生长因子作为观察的重点,以研究中药对于神经干细胞再生是直接影响或是间接调控。还考虑观察若干造成再生障碍的影响因素,通过减弱这些障碍因素而促进神经干细胞的再生。