抗坏血酸对拮抗菌卡利比克毕赤酵母生防效力及氧化胁迫耐受性影响的研究

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研究表明,在果实病原真菌的生物防治中,具有拮抗活性的酵母菌被认为是化学杀菌剂最有效的替代方法。由于各种环境因素的影响,在实际运用中,拮抗菌对果实病害的防治效力与化学杀菌剂相比仍有较大的差距。拮抗菌在各种胁迫条件下生存能力下降,而营养与空间竞争又是产生生防效力的主要原因,因此导致了生防效力的大大降低,从而达不到预期效果。氧化胁迫就是最主要的环境因素之一。卡利比克毕赤酵母是一株具有生防效果且安全无害的酵母,但其防治水果采后病害的效力仍需提高。  本论文研究抗坏血酸增强卡利比克毕赤酵母的氧化胁迫耐受性以及生防效力,并探讨其机制。具体研究内容如下:(1)VC结合Pichia.caribbica对苹果采后病害的生物防治效力的影响;(2) VC对P.caribbica生长动态的影响;(3)氧化胁迫条件下,VC对P.caribbica生理生化机制的影响;(4)氧化胁迫条件下,VC对P.caribbica蛋白质表达的影响。论文的主要研究结果如下:  (1)与P.caribbica单独使用相比较,VC能大大提高P.caribbica的生防效果,且VC最终浓度为250μg/mL时具有最好的效果。  (2)250μg/mL的VC显著地提高了苹果伤口以及表面上P.caribbica的生长动态。  (3) P.caribbica容易受到氧化胁迫的影响。在氧化胁迫条件下,VC处理能提高P.caribbica氧化胁迫耐受性,并表现出较高的生存能力及较低的ROS水平。其可能机制包括,VC处理能降低P.caribbica细胞内ROS含量,脂质过氧化、蛋白质氧化程度。VC处理能诱导提高P.caribbica体内抗氧化酶活性,包括:超氧化物歧化酶(SOD),过氧化氢酶(CAT),抗坏血酸过氧化物酶(APX),多酚氧化酶(PPO)、过氧化物酶(POD); VC处理能诱导P.caribbica体内抗氧化非酶物质谷胱甘肽(GSH)含量的提高;VC处理能诱导P.caribbica体内抗逆性物质海藻糖含量的提高。  (4)在氧化胁迫作用下,VC处理能诱导P.caribbica产生差异蛋白。共检测出61种蛋白,包括40种上调蛋白和21种下调蛋白。差异蛋白主要与基础代谢相关,除此之外还有与应激反应相关,与合成,转运相关蛋白。  基于以上结果,VC能显著提高P.caribbica伤口及表面处生长动态以及氧化胁迫耐受性,从而提高其生防效果。因此VC与P.caribbica结合处理是提高其控制苹果采后病害效力的有效方法。
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