基于代谢组学的儿童紫癜性肾炎血清代谢物研究

来源 :辽宁中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ADCADC111111
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目的:运用液相色谱质谱联用技术(LC-MS)分析研究儿童紫癜性肾炎患儿与健康儿童、紫癜性肾炎热毒伤络证与气虚血瘀证患儿的血清代谢物,为紫癜性肾炎及其中医证型的物质基础研究提供参考。材料与方法:1.样本收集与分组:在辽宁中医药大学附属医院门诊,选择符合纳入标准的紫癜性肾炎患儿15例为紫癜肾组(N),其中包括气虚血瘀证5例(N1)、热毒伤络证10例(N2)。收集上述患儿静脉血标本,同时招募10例健康儿童作为对照组(H),详细告知其家长所参加的研究项目目的,均签署知情同意书,本研究方案得到辽宁中医药大学医学伦理委员会批准。2.运用液相色谱质谱联用技术对样品进行全面的扫描与检测,结合代谢组学分析方法对血清代谢物进行探究分析,将所得的原始数据进行预处理后导入相关软件,对所得的小分子化合物进行定性及定量分析。使用多元统计和模式判别分析方法,查找紫癜性肾炎患儿与健康儿童、紫癜性肾炎热毒伤络证和气虚血瘀证间有统计学意义的差异性代谢物;通过代谢组学数据库对差异性代谢物进行筛选比对,初步确定相关生物标志物,并进行代谢通路分析。结果:1.在PLS-DA、OPLS-DA模式判别图中,紫癜肾组、健康对照组样本各自呈组内聚集分布;紫癜肾组与健康对照组样本分别分布于中心轴两侧,两组样本在图中明显区分,说明紫癜性肾炎患儿与健康儿童代谢状态有显著差异。2.在PLS-DA、OPLS-DA模式判别图中,热毒伤络组、气虚血瘀组也各自呈组内聚集分布;热毒伤络组与气虚血瘀组样本分布于中心轴两侧,两组样本在图中明显区分,说明紫癜性肾炎热毒伤络证与气虚血瘀证的代谢状态也存在显著差异。3.紫癜肾组与健康对照组的血清代谢物对比研究发现,鉴定出7种差异性代谢产物,分别为:三羟基异丁酸、胞二磷胆碱、苯丙氨酸、脱氧腺苷三磷酸、精氨酸、脯氨酸、酪氨酸。其中,这7种差异性代谢产物与缬氨酸,亮氨酸和异亮氨酸的降解、甘油磷脂代谢、苯丙氨酸代谢、嘌呤代谢、精氨酸和脯氨酸代谢、酪氨酸代谢等代谢途径有关。4.儿童紫癜性肾炎热毒伤络组和气虚血瘀组血清代谢物对比研究发现,鉴定出4种差异性代谢产物,分别为:色氨酸、甘氨酸、酪氨酸、胞二磷胆碱。这4种差异性代谢物与苯丙氨酸,酪氨酸和色氨酸的生物合成、甘油磷脂代谢、甘氨酸,丝氨酸和苏氨酸的代谢、酪氨酸代谢等代谢途径有关。5.紫癜性肾炎与健康对照组、紫癜性肾炎热毒伤络组与气虚血瘀组有2种相同的差异性代谢产物,分别为胞二磷胆碱和酪氨酸。结论:1.紫癜性肾炎患儿与健康对照儿童对比,存在7种差异性代谢产物,三羟基异丁酸、胞二磷胆碱、苯丙氨酸、脱氧腺苷三磷酸、精氨酸、脯氨酸、酪氨酸。涉及6条代谢通路:缬氨酸,亮氨酸和异亮氨酸的降解、甘油磷脂的代谢、苯丙氨酸的代谢、嘌呤代谢、精氨酸和脯氨酸的代谢、酪氨酸代谢,与蛋白质、脂类、糖类等代谢有关,为紫癜性肾炎的早期诊断提供理论依据,完善了紫癜性肾炎的中医诊断体系。2.紫癜性肾炎热毒伤络组与气虚血瘀组相比,存在4种差异性代谢物:色氨酸、甘氨酸、酪氨酸、胞二磷胆碱,涉及4条代谢通路:苯丙氨酸,酪氨酸和色氨酸的生物合成、甘油磷脂代谢、甘氨酸,丝氨酸和苏氨酸的代谢、酪氨酸代谢,可为儿童紫癜性肾炎中医证型的物质基础研究提供参考。
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