几种药用芳香植物的抗氧化、抗菌、降糖和抗癌活性

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Pulicaria inuloides是Asteraceae科Pulicaria属植物,它被广泛用作抗癌药物,并用于治疗糖尿病、风湿、痛风、膀胱炎、肾炎、痛经、牙痛、头痛等,并具有抗菌,抗凝血等功效。P.inuloides含有生物碱、挥发油、萜类、酚酸、类黄酮、单宁酸等成分。第一阶段,从药用芳香植物Pulicaria inuloides-Astereceae和Ocimum forskoleiLamaiceae叶子中得到精油,从精油中分离并鉴定生物活性物质。然后测定分离出的物质的抗氧化活性、总酚含量和抗微生物活性。结果表明与O.forskolei相比,P.inuloides有较高的总酚量(O.forskolei为54.6±30 mg GAE/g提取物,P.inuloides为144±5.32 mg GAE/g提取物);P.inuloides具有较高的抗氧化活性,DPPH清除率分别为26.76±0.11%(O.forskolei)和92.92±0.10%(P.inuloides),IC50分别为73.03±0.05(O.forskolei)和4.5±0.05(P.inuloides);P.inuloides有更高的β胡萝卜素漂白值:分别为41.03±6.35%(O.forskolei)和90.77±0.21%(P.inuloides)。P.inuloides的精油能够抑制除鼠伤寒沙门氏菌和志贺氏痢疾杆菌以外的所有测试微生物,并且对大肠杆菌的最小抑制浓度(MIC)为3.0μg/m L。O.forskolei精油仅抑制白色念珠菌。第二阶段,通过用气相色谱-质谱联用法鉴定P.inuloides和O.forskolei根中的挥发性化合物结果表明,与O.forskolei相比,P.inuloides根中含有较高的总酚含量(P.inuloides为55.4±0.1,O.forskolei为35.3±0.2mg GAE/g提取物);P.inuloides具有较低的抗氧化活性,DPPH清除率分别为23.07±0.06%(P.inuloides)43.97±0.18%(O.forskolei),IC50值分别为80.01±0.03(P.inuloides)和31.18±0.01(O.forskolei);P.inuloides有较低的β胡萝卜素漂白值:分别25.3±0.3%(P.inuloides)和39.9±0.7%(O.forskolei)。P.inuloides精油能抑制除鼠伤寒沙门氏菌,痢疾杆菌和大肠杆菌以外的所有测试微生物。在第三阶段,研究溶剂类型对Pulicaria inuloides(Arecaceae)中多酚、单宁、花青素和类黄酮提取的影响,以及对其抗氧化和抗菌活性影响的研究。提取中分别采用超声处理30分钟,频率为50 Hz,速度为70 rpm。结果表明,总多酚含量(TPC)、总黄酮(TFC)和总的丹宁含量(TTC)以及抗氧化能力在使用甲醇提取时达到最大。P.inuloides的甲醇和乙醇提取物对于所有选定的微生物都具有较低的抗菌活性。二乙醚提取物对选定的所有被测试细菌没有抗菌活性。第四阶段,蚤草属inuloides叶的乙醇提取物的GC-MS分析显示10峰指示存在10个化合物。第五阶段,研究从P.inuloides中提取分离的酚类化合物的抗氧化和抗菌活性,并对其脂肪酸和生育酚含量进行评价。通过大孔树脂柱层析分离得到酚类化合物,然后利用高效液相色谱法进行分析。提取物中γ-生育酚具有最高含量,大约占总生育酚的52.76%,其次是α-生育酚(29.83%)和δ-生育酚(17.41%)。另外,P.inuloides中含有大量的钾,镁,钠,铁和钙,含量分别为159.5,29.5,14.2,13.875和5.225mg/100g。利用扫描电镜、透射电镜(TEM,SEM and EDX)揭示了P.inuloides的内部结构。第六阶段,将P.inouloides叶子中的精油(PIEO)应用在海产品juvenile kachlan(Trachinotus ovatus,Linnaeus)上。结果表明,P.inuloides的精油抑制所有测试的微生物,对大肠杆菌的最小抑制浓度(MIC)为2.0μg/m L。本研究以纯水为对照组,研究了Pi EO应用在鱼片上对单核细胞增生李斯特氏菌、大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的影响。结果表明,以纯水做参照,应用了Pi EO后(25℃),立即消除了鱼片上大部分单核细胞增生李斯特氏菌、大肠杆菌和金黄色葡萄球菌,降低了固相细胞计数值(SPC)。在10℃下12天内也可减少以上细菌的含量,在10℃保存条件下,延长了食品的货架期。在贮藏结束时,SPC计数>7 log cfu/g。感官评价证明P.inouloides精油处理后的鱼片是可以被消费者接受的。结果还表明,从超市(江苏,无锡)购买的鱼产品拥有良好的卫生及健康条件,而从当地市场购买的鱼产品则不达标准。在下一阶段,验证P.inouloides叶中的精油对于糖尿病的效果。精油的化学分析结果表明它的成分中含有生物碱、类固醇、皂甙、糖苷、还原糖和萜类化合物。在250μg/ml的浓度下,P.inuloides叶子精油对α-淀粉酶和α-葡糖苷的抑制活性分别为85.50%和86.52%,IC50值分别为140.49μg/ml和128.33μg/ml。P.inuloides叶子精油在实验剂量水平(400 mg/kg体重)下可以降低糖尿病大鼠的空腹血糖水平。到了实验的第21天,在P.inuloides叶子精油处理组,大鼠血糖值下降到与糖尿病药物处理组大鼠没有明显差异(P<0.05)。在链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病模型大鼠中,P.inuloides叶子精油可以降低大鼠的总胆固醇,甘油三酯和低密度脂蛋白(LDL)水平,同时会增加高密度脂蛋(HDL)水平。在实验的21天内,大鼠体重保持稳定。在链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病模型大鼠中,反应肝功能的标志物谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)和碱性磷酸酶(ALP)含量的显著升高。而P.inuloides叶子精油的处理可以显著降低大鼠体内这些酶的水平(P<0.01)。在链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病模型大鼠中,肌酐、尿素氮、总蛋白等肾功能标记物含量显著升高。而P.inuloides叶子精油的处理可以显著降低大鼠体内以上指标的水平(P<0.01)。这些结果表明,糖尿病大鼠都患有肾功能障碍。肝脏组织病理学研究表明,与对照组相比,P.inuloides叶子精油能广泛改善胰岛细胞的生理状况。P.inuloides的毒理试验结果显示,P.inuloides没有任何导致急性毒性的迹象,如呼吸窘迫,昏迷或死亡等。在最后一部分细胞实验中,结果显示对P.inuloides叶子精油MCF-7细胞,具有很强的细胞毒活性的作用,IC50分别为12.9和3.00μl/ml。Pi EO的精油抑制所有测试的微生物(Listeria)。并运用光学显微镜对MCF-7细胞形态进行了分析。
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