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抗菌肽(AMPs)又称抗微生物肽、宿主防御肽和抗生素肽,属于生物体自身防御系统的重要组成部分,具有抗细菌、真菌、酵母、病毒和不容易对病原菌产生抗药性等特点。AMPs的这些特点使得它能够替代化学杀菌剂的使用,达到控制植物病害的目的。为了进一步挖掘出新的抗菌肽资源,本研究以实验室保存的从腐败湿粉条分离得到的20株芽孢杆菌作为菌株材料,从中筛选对粉红单端孢(Trichothecium roseum)有拮抗作用的菌株,并对该拮抗菌株发酵液中抑菌活性物质进行分离纯化和结构鉴定,旨在为研究和开发新型生物农药提供了科学理论依据。取得的主要研究结果如下:1.筛选获得了一株高活性拮抗菌株。通过琼脂平板对峙法从腐败湿粉条分离获得的20株芽孢杆菌中筛选得到一株可以抑制粉红单端孢(T.roseum)生长的菌株B10,经16S rRNA分子生物学方法鉴定该菌株为短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)HN-10,菌株登录号为KT003256.1。并被收藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心(CGMCC No.15031)。2.确定了短小芽孢杆菌(B.pumilus)HN-10的抑菌谱。通过琼脂平板对峙法测得B.pumilus HN-10抑菌谱。结果表明短小芽孢杆菌(B.pumilus)HN-10仅对粉红单端孢(T.roseum)有抑制作用。3.分离纯化出2种抗真菌肽。采用硫酸铵沉淀、AB-8大孔吸附树脂、Sephadex G-100凝胶及半制备型RP-HPLC色谱法对短小芽孢杆菌(B.pumilus)HN-10发酵液中活性成分进行分级纯化,并得到3组具有强烈抑制粉红单端孢霉(T.roseum)生长的组分A、B、C。4.明确了抗菌肽的理化性质。对抗菌肽进行理化性质研究,结果表明抗菌肽具有较好的热稳定性、酶稳定性和pH稳定性。5.测定了2种抗真菌肽的一级结构。利用LC-MALDI-TOF-MS质谱对组分A、B、C进行结构分析鉴定,确定组分A为含有11个氨基酸残基,分子量为1142.28Da的阳离子抗真菌肽P-1,氨基酸序列为PLSSPATLNSR;组分B与C被确定为是同一种化合物,含有15个氨基酸,分子量为1149.14 Da的抗真菌肽P-2,氨基酸序列为GGSGGGSSGGSIGGR。将P-1和P-2的氨基酸序列同NCBI和抗菌肽(APD)数据库进行序列比对,发现P-1和P-2的氨基酸序列与其它已知抗菌肽同源性较低,最高分别只达到41.66%和45%,因此判断P-1和P-2均为新型抗菌肽。且两种抗真菌肽的最小抑菌浓度均为1μg/mL。