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目的本研究运用“健脾养血祛风法”治疗脾虚血燥型AD。临床记录AD患者的SCORAD积分在治疗前后的变化情况,对“健脾养血祛风法”治疗AD确定疗效。以角质形成细胞为实验对象,通过观察健脾养血祛风方不同含药浓度对体外培养HaCat细胞增殖的影响,以及检测HaCat细胞中相关皮肤屏障功能蛋白以了解健脾养血祛风方在实验中对HaCat细胞相关蛋白的影响?方法选取2—65岁AD患者60例,实验组及对照组各30例,实验组口服中药,对照组口服氯雷他定,两组均配合外用青鹏软膏,疗程4周,评价两组SCORAD评分变化及血清相关蛋白水平。另设30例健康组作为阴性对照,检测健康组血清相关紧密连接蛋白含量并与AD患者作对比,分析AD患者与健康人皮肤屏障相关蛋白的差异。通过体外培养HaCat细胞,在倒置显微镜下观察该方药对HaCat细胞的生长增殖影响。并采用Western blot法测定HaCat细胞内的紧密连接蛋白—连接黏附分子(JAM-A)?水闸蛋白—1(Claudin-1)?闭锁蛋白(Occludin)?闭锁小带蛋白(ZO-1)的表达水平,观察健脾养血祛风对紧密连接蛋白水平的影响。结果1.临床疗效观察治疗组和对照组的总有效率分别为90%和66.66%,两组疗效差异有统计学意义。SCORAD评分在治疗4周后两组均有一定下降,经统计学比较后,治疗组疗效优于对照组,差异有统计学意义。临床研究过程中两组未见明显不良反应。治疗4周后随访复发情况,治疗组与对照组在复发情况中无统计学意义。2.紧密连接相关蛋白与AD病情关系分析通过对纳入研究的60例AD患者和30例健康人血清中紧密连接蛋白的测定,Claudin—1蛋白与SCORAD评分呈负相关关系,AD组平均Claudin—1蛋白含量为1.29±0.33,健康组为2.18±0.5,A D患者Claudin—1蛋白比正常人血清含量低。3.HaCat细胞的生长增殖情况健脾养血祛风方可以促进HaCat细胞的增殖,随着药液浓度的升高,增殖作用越明显,但在500μg/ml浓度时,反而对细胞产生一定的抑制作用。其中在100μg/ml浓度对HaCat细胞的增殖作用最为明显。4.紧密连接相关蛋白测定结果Western Blot技术检测HaCaT细胞中4种蛋白的表达水平,随着药液浓度的升高,紧密连接相关蛋白随之上升,其中在100μg/ml浓度时最明显,随着浓度再上升,蛋白量不再升高。给药组细胞中Occludin、JAM-A、Claudin-1、ZO-1蛋白的表达显著高于空白组。结论“健脾养血祛风法”治疗AD具有一定的疗效,与口服西药组相比,治疗4周后患者的症状明显改善,且在治疗中未见明显不良反应,从长远来看,此法治疗脾虚血燥证特应性皮炎有一定优势,值得临床推广。本次研究结果表明,紧密连接蛋白与AD发病密切相关,Claudin-1蛋白可作为AD疾病发生发展过程的重要指标。健脾养血祛风方可以促进HaCat细胞的增殖,该方随着浓度的增加,紧密连接相关蛋白随之上升,在100μg/ml浓度时最明显。