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目的： 探讨LMTK3在人肺腺癌细胞株A549中下调表达后对细胞增殖、迁移、周期及凋亡的生物学特性的影响。 方法： 将含有LMTK3的慢病毒短发夹RNA（short hairpin RNA,shRNA）的干扰载体与慢病毒包装辅助质粒共转染人胚293T细胞后，收集上清感染肺癌细胞A549，经嘌呤毒素筛选稳定干扰 LMTK3 表达的靶细胞。RT-PCR 检验转染前后 LMTK3 mRNA在A549细胞中的表达水平，分别采用CCK8法检测细胞的增殖能力，划痕实验及transwell小室实验检测的细胞的迁移能力，流式细胞术检测细胞的凋亡和周期。 结果： 我们通过 shRNA 技术成功构建 LMTK3 稳定下调表达的肺癌细胞株shLMTK3及对照组Scramble。RT-PCR结果显示，与Scramble组比较，shLMTK3组LMTK3 mRNA水平显著下降（t=10.05,P<0.001）；CCK8检测结果显示，在培养24、48、72h后，shLMTK3组细胞相对增殖水平（0.305±0.018，0.461±0.044，0.74±0.029）显著低于Scramble组 (0.354±0.011，0.551±0.027，0.881±0.028)，差异有统计学意义（t=5.24，P<0.001；t=3.91,P<0.01；t=7.70,P<0.001）；划痕试验结果表明，划痕后24h， shLMTK3组细胞相对迁移倍数（0.51±0.096）显著低于Scramble组（1±0.029），差异有统计学意义（t=4.81,P<0.01）；Transwell迁移实验结果表明，shLMTK3组迁移到膜下的细胞数目（161±9.29）明显低于 Scramble 组（308.66±17.60），差异有统计学意义（t=7.42,P<0.01）；细胞周期检测结果显示，抑制LMTK3的表达可将细胞可阻滞在G1期,细胞的增殖受抑制，差异有统计学意义（t=4.35，P<0.05）；细胞凋亡试验显示，抑制LMTK3的表达对A549细胞的凋亡率无影响（t=2.61,P>0.05）。 结论： 成功构建LMTK3稳定下调表达的肺细胞株A549，并证实LMTK3下调表达后可显著抑制A549细胞的增殖及迁移能力，发生G1期阻滞，提示肺癌细胞异常表达LMTK3参与调节其肿瘤生物学行为。