重组超耐热酸性α-淀粉酶的产生条件、分离纯化和性质研究

来源 :中国科学院微生物研究所 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wzpyccx
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  本文研究了转化子生长和诱导的条件,包括培养基的起始pH、接种量、诱导pH值、甲醇浓度、摇瓶装液量及不同诱导时间对超耐热酸性α-淀粉酶表达的影响,通过超滤浓缩、脱盐,再用聚丙烯酰胺垂直板凝胶电泳进行纯化,得到电泳纯的超耐热酸性α-淀粉酶,纯化倍数为11.7,活力回收率为29.8﹪;用SDS-PAGE测得该酶的分子量为55kD;纯酶的最适反应温度为95℃,最适反应pH值为4.5,同时具有很好的热稳定性和pH稳定性,110℃保温1小时残留60﹪活力,在pH4.0~pH5.0室温放置48小时酶活没有变化;酶的等电点pI(室温)为5.0;在95℃的条件下以可溶性淀粉为底物的Km值为1.12g/L;用硫酸-酚法测得其含糖量为15.4﹪;Cr3+、Fe2+、Cu2+抑制酶的活性,Ca2+对酶活无影响;EDTA和DTT对酶的活性无影响。
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