代谢信号对犊牛脂肪细胞脂联素、激素敏感脂肪酶基因表达的影响

来源 :吉林农业大学 | 被引量 : 5次 | 上传用户:RichieHDD
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为了探讨代谢信号对奶牛脂肪细胞脂联素和激素敏感脂肪酶的影响,在体外单层培养13d的犊牛的成熟脂肪细胞中,添加不同梯度浓度的胰岛素(0、5、10、20、50、100nmol/L)、胰高血糖素(0、25、100、200、500、1000pg/mL)、葡萄糖(0、5、10、15、20、25 mmol/L);体外培养3d的犊牛小网膜脂肪组织中添加不同梯度浓度的非酯化脂肪酸(0、0.5、1.0、1.5mmol/L)并设置三个重复,添加后24h提细胞总RNA,通过荧光定量PCR技术,观测这些不同梯度浓度的几种代谢信号对牛脂肪细胞ADPNmRNA与HSLmRNA丰度的影响。实验结果表明:①ADPN基因的表达随着添加的胰岛素浓度增长而减少。5nmol/L、10nmol/L浓度的胰岛素抑制ADPN基因的表达但差异不显著(P>0.05),浓度为20nmol/L的胰岛素显著抑制ADPN基因的表达(P<0.05),而当胰岛素浓度达到50nmol/L、100nmol/L时则极显著的抑制其基因表达(P<0.01)。HSL基因的表达也随着添加的胰岛素浓度增长而减少。添加5nmol/L和10nmol/L的胰岛素组虽抑制了HSL基因表达,但与对照组相比较,其差异均不显著(P>0.05),其它浓度(20、50、100nmol/L)的胰岛素均极显著的抑制HSL基因表达(P<0.01);②胰高血糖素促进ADPN与HSL基因的表达(P<0.05),当添加浓度为200 pg/mL或小于此浓度时与对照组比较差异不显著。当胰高血糖素浓度为500pg/mL和1000pg/mL时极显著的促进ADPN基因的表达(P<0.01)。25pg/mL浓度或以上浓度梯度(100、200、500、1000pg/mL)的胰高血糖素均极显著的促进HSL基因表达(P<0.01);⑧5mmol/L浓度的葡萄糖显著抑制ADPN基因的表达(P<0.05),其它梯度浓度(10、15、20、25mmol/L)的葡萄糖均极显著的抑制ADPN基因的表达(P<0.01)。20mmol/L、25mmol/L浓度的葡萄糖显著(P<0.05)促进HSL基因的表达,其它浓度(5、10、15mmol/L)的葡萄糖对促进HSL基因表达不显著(P>0.05);④0.5mmol/L浓度的NEFA虽然促进了ADPN基因的表达,但其差异不显著(P>0.05),当NEFA达到1.0mmol/L浓度时它对ADPN的基因表达有显著的促进作用(P<0.05),当NEFA浓度为1.5mmol/L时它对ADPN的表达呈下降趋势(P>0.05)。添加NEFA还有降低脂肪细胞内HSL拷贝数(Qty)的趋势,但三个添加组(0.5、1.0、1.5mmol/L)与空白对照组相比较其差异均不显著(P>0.05)。实验结果表明:胰岛素抑制ADPN、HSL基因表达,其抑制作用呈剂量依赖性;胰高血糖素促进ADPN、HSL基因表达,其促进作用呈剂量依赖性;葡萄糖抑制ADPN基因表达,促进HSL基因表达,其抑制和促进作用呈剂量的依赖性;不超过1.0mmol/L浓度的非酯化脂肪酸促进ADPN基因的表达,超过该浓度时ADPN基因的表达量开始有下降的趋势。非酯化脂肪酸对HSL基因的表达有抑制作用,其抑制作用呈剂量的依赖性。
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