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目的:探讨StAR、α-抑制素、CD99、Calretinin在卵巢及睾丸性索间质肿瘤中的表达情况,从而为临床病理论断和鉴别诊断提供科学依据。
方法:
1)用Western blot方法检测StAR抗体的特异性。
2)收集①人的15例非肿瘤性睾丸活检组织和10例进行根治术的正常卵巢组织切片。②经临床病理确诊的卵巢及睾丸性索间质肿瘤52例,其中粒层细胞瘤31例(成年型粒层细胞瘤29例、幼年型粒层细胞瘤2例),卵泡膜纤维瘤10例,卵泡膜细胞瘤1例,黄素化卵泡膜细胞瘤2例,卵巢支持间质细胞瘤4例,睾丸支持细胞瘤1例,睾丸间质细胞瘤3例。③229例非性索间质肿瘤的组织。α-抑制素、CD99、Calretinin均为鼠单克隆抗体,StAR为兔单克隆抗体。结果判定:StAR阳性表达在细胞浆呈棕黄色颗粒状,α-抑制素阳性表达在细胞核或浆,CD99及Calretinin阳性表达在细胞膜或浆。对阳性细胞百分率和免疫组化表达强度进行半定量评价:阴性领域被排除在评价外。分数计算如下:0,代表完全无阳性细胞;1+(1分),代表≤10%的阳性细胞;2+(2分),代表11%至50%的阳性细胞,3+(3分),代表51%至100%的阳性细胞。强度等级为三个等级:无染色0分、弱(淡黄色)1分及强(棕黄色)2分。
3)统计学处理:将α-抑制素、CD99、Calretinin阳性细胞百分率和免疫组化表达强度分别与StAR的阳性细胞百分率和表达强度作比较,用SPSS13.0统计软件进行统计分析,计数资料多个样本比较采用秩和检验Kruskal-Wallis H检验,样本间两两比较采用Mann-whitney U检验。取α=0.05作为检验标准。
结果:
1)采用Western blot检测人的正常卵巢、子宫内膜、腮腺及黄体组织中的StAR表达情况。结果表明本实验所选用的StAR具有特异性。
2)免疫组化法显示,在非肿瘤睾丸组织中,睾丸的间质细胞StAR表达阳性,而支持细胞和生精细胞均为阴性。在正常卵巢组织中,成熟卵泡的卵泡膜内层细胞、黄体期的卵泡膜内层细胞及粒层细胞的StAR表达阳性。
3)31例粒层细胞瘤中,29/31(94%)成年型粒层细胞瘤的StAR表达结果与CD99及α-抑制素相比,StAR表达的强度更强(P<0.05)(表5(2))。但是,α-抑制素及Calretinin阳性细胞数均显著高于StAR阳性细胞(P<0.05)(表5(1))。2例幼年型粒层细胞瘤中StAR表达均为阳性且超过20%的肿瘤细胞呈阳性表达。在2例黄素化卵泡膜细胞瘤中,黄素化肿瘤细胞也强烈的表达StAR。4例支持间质细胞瘤(1例高分化,3例中分化)中,StAR或弱或强的表达在间质细胞中,而支持细胞中没有发现。在3例睾丸间质细胞瘤中,睾丸间质细胞表达的StAR呈强阳性。10例卵泡膜纤维瘤中,一些分散的黄素化卵泡膜细胞表达StAR。
4)在229例非性索间质肿瘤的组织中,4例卵黄囊瘤中发现有1例StAR表达阳性,但阳性细胞是散在的非肿瘤间质细胞,并非肿瘤细胞。卵巢交界性浆液性囊腺瘤8例中有4例呈阳性表达并且也在非肿瘤间质中。4例肾上腺皮质腺癌中3例StAR表达阳性且超过50%的肿瘤细胞呈阳性表达。其余213例组织StAR表达均为阴性。
结论:①在非肿瘤睾丸和正常卵巢组织中,睾丸的间质细胞、成熟卵泡内卵泡膜细胞、黄体内卵泡膜细胞及粒层细胞的StAR表达阳性。
②在卵巢及睾丸性索间质肿瘤中,StAR几乎在所有的Leydig细胞瘤中都有表达,在Sertoli-Leydig细胞瘤中只在Leydig细胞中表达,个别粒层细胞瘤中黄素化的粒层细胞表达阳性,并且在成年型粒层细胞瘤中StAR阳性细胞数目比幼年型粒层细胞瘤低。黄素化卵泡膜细胞瘤中黄素化的肿瘤细胞表达阳性。因此,StAR可以作为含Leydig细胞的肿瘤诊断的特异性标记物,并且其较高的敏感性和特异性对区分性索间质肿瘤的组织类型有一定应用价值。
③在非性索间质肿瘤的组织中,除个别卵黄囊瘤,卵巢交界性浆液性囊腺瘤的少量间质细胞及肾上腺皮质腺癌中StAR表达阳性外,其余组织均为阴性。