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近年来,随着侵袭性真菌感染危险因素的增多,其感染的发病率和死亡率不断上升,但感染的菌种仍以念珠菌属感染为主,其中白念珠菌是最常见的条件致病性真菌。由于抗真菌药物长期反复的广泛应用,导致耐药现象不断增加。因此,探讨白念珠菌耐药机制,指导临床合理用药,具有十分重要的意义。目的:探讨白念珠菌对常见抗真菌药物的耐药性。对临床分离的白念珠菌ERG3基因行DNA提取、PCR扩增、测序及生物信息学分析。对ERG3基因表达的mRNA进行相对定量分析。明确白念珠菌ERG3基因突变及高表达与白念珠菌临床株耐药性的关系。方法:收集临床患者分离的白念珠菌36株。运用KOH镜检、沙氏培养基、CHROMagar念珠菌显色培养基和API20CAUX鉴定系统进行鉴定。对36株白念珠菌行体外药物敏感性试验,获得耐药菌株和敏感菌株。提取白念珠菌ERG3基因组DNA,行PCR扩增,将扩增后的产物纯化测序,与genbank中已知的标准序列(AF069572)进行BLAST比对分析;采用实时定量PCR(RT-PCR)法,对白念珠菌ERG3基因表达的mRNA行相对定量分析。结果:(1)36株经鉴定后的白念珠菌体外药物敏感性试验结果显示:白念珠菌对5-氟胞嘧啶和两性霉素B有较高的敏感性,对氟康唑、伊曲康唑、伏立康唑的耐药率分别为50.06%、72.22%和58.33%。(2)19株白念珠菌的ERG3基因发生同义突变,它们发生的突变位点分别为T51C、T381C、T432C、C438T、T1044C,均不引起编码氨基酸的改变。2株白念珠菌发生错义突变,1052位碱基由C突变为T,导致第351位氨基酸由丙氨酸转变为缬氨酸,发生错义突变的菌株产生多重耐药。(3)对白念珠菌氟康唑的耐药菌株和敏感菌株ERG3mRNA的表达水平进行检测。18株氟康唑耐药菌中白念珠菌ERG3mRNA的高表达率达94.4%,16株氟康唑敏感菌中ERG3mRNA高表达率达50.0%。在高表达菌株中存在多重耐药和交叉耐药现象,并有1株菌发生错义突变,其余部分菌株发生同义突变。结论:(1)白念珠菌对5-氟胞嘧啶、两性霉素B敏感性较高,对氟康唑、伊曲康唑和伏立康唑有不同程度的耐药,且对伊曲康唑、伏立康唑的耐药率高于氟康唑,存在多药耐药和交叉耐药现象。(2)本研究表明ERG3基因突变及高表达均可能是引起白念珠菌产生耐药的重要因素之一,两者之间的相互作用有待进一步深入的探讨。同时可能有多种调节机制共同参与白念珠菌耐药的形成。