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目的：帕金森病(parkinson’s disease，PD)是一种进行性神经系统退行性疾病，主要发生于中老年人群，但有关多巴胺能神经元死亡、缺失的确切发病机制，目前尚不清楚。本研究旨在观察磷酸化蛋白激酶Cδ亚型(protein kinase C δ，PKCδ)在6羟基多巴胺(6-hydroxydopamine，6-OHDA)诱导的多巴胺能神经细胞系(大鼠PC12细胞株和人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞系)凋亡过程中所起的作用，探讨帕金森病发病的可能分子机制。
方法：体外培养多巴胺能神经细胞PC12和SH-SY5Y细胞系，以神经毒素6-OHDA处理，模拟制造PD细胞模型。通过加用PKC抑制剂和激动剂进行干预，从而观察PKC抑制剂和激动剂对6-OHDA毒性作用的影响，分别用台盼蓝染色、流式细胞仪、原位末端标记(TUNEL)染色和透射电镜法观察细胞凋亡，蛋白免疫印迹法(Western blotting)观察磷酸化PKCδ的表达。
结果：在PC12和SH-SY5Y细胞系中应用6-OHDA处理后可引起细胞死亡，并分别在应用200 μ mol/L和100 μ mol/L浓度处理时引起的细胞死亡以诱导凋亡形式实现。台盼蓝染色结果提示：应用PKCδ抑制剂Rottlerin预处理后可明显提高细胞生存率(P<0．05)，而用总PKC抑制剂Bis和钙依赖性PKC抑制剂Go6976预处理后不能改善细胞生存率(P>0.05)。流式细胞仪、TUNEL染色和透射电镜法观察及Western免疫印迹结果提示：PKCδ抑制剂Rottlerin可抑制PKCδ的磷酸化表达，减轻6-OHDA引起的细胞凋亡。PKCδ激活剂Phorbol-12-myristate 13-acetate(PMA)加重6-OHDA的毒性作用，使细胞凋亡率上升，导致PKCδ磷酸化表达增加。总PKC抑制剂Bis和钙依赖性PKC抑制剂G66976不能减轻6-OHDA引起的细胞凋亡。
结论：磷酸化PKCδ参与6-OHDA诱导的多巴胺能神经细胞凋亡。PKCδ抑制剂Rottlerin减轻6-OHDA诱导的多巴胺能神经细胞凋亡。PKCδ激活剂PMA可诱导多巴胺能神经细胞凋亡增加。在6-OHDA诱导多巴胺能神经细胞凋亡的分子通道中，PKCδ的磷酸化是重要环节之一，PKCδ可能直接参与帕金森病人的神经元凋亡过程。