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第一部分,目的:采用紫外线反复照射裸鼠局部皮肤的方法,造成皮肤光老化,探索建造皮肤光老化模型的新方法。
方法:紫外线照射裸鼠背部右侧标记区域皮肤(2.5cmxl.5cm),并以对侧未照射皮肤作为对照,观察紫外线对皮肤老化的影响。照射方法:第1周每次给予裸鼠紫外线照射量为180mj/cm2(180mj/cm2为最小致红斑量),第2-4周每周能量比前一周增加1/3,分别为240mj/cm2、300mj/cm2、360mj/cm2,此后第五周起维持360mj/cm2分别至6周(A组)、8周(B组)、10周(C组)。每周每只裸鼠照射3次。每组完成最后一次照射24小时后处死,取标记区域照射皮肤和对侧未照射皮肤,进行HE染色,并检测超氧化物歧化酶(SOD)、羟脯氨酸(Hyp)、丙二醛(MDA)等生化指标。
结果:照射10周(C组)的裸鼠标记区域皮肤HE染色显示表皮明显增厚,真皮组织排列紊乱,SOD、Hyp、MDA指标与对侧未照射组具有统计学差异,符合光老化皮肤特性。
结论:紫外线局部照射裸鼠皮肤10周的皮损状态可以作为皮肤光老化相关研究使用的模型。
第二部分,目的:研究a硫辛酸对中波紫外线反复照射引起的裸鼠皮肤光老化的影响。
方法:将紫外线照射的裸鼠背部右侧标记区域皮肤(2.5cm×1.5cm),设为阳性组;对侧不照射部位,设为阴性组。照射方法:第1周每次给予裸鼠紫外线照射量为180mj/cm2(180mj/cm2为最小致红斑量),第2-4周间能量较前一周增加1/3,分别为240mj/cm2、300mj/cm2、360mj/cm2,此后第5周起维持360mj/cm2照射至第10周结束。每周每只裸鼠照射3次。每次照射完成后分别予以不处理、皮下注射生理盐水和皮下注射硫辛酸三种方法处理,进一步分为A1未照射组、A2单纯照射组、B1阴性对照组、B2阳性对照组、C1阴性实验组和C2阳性实验组。每只裸鼠最后一次处理24小时后处死,取标记区域照射皮肤和对侧未照射皮肤,进行HE染色,并检测活性氧(ROS)、一氧化氮(NO)超氧化物歧化酶(SOD)、羟脯氨酸(Hyp)、丙二醛(MDA)等生化指标。
结果:紫外线照射后注射硫辛酸的C2阳性实验组皮肤HE染色显示结构完整,较薄,表皮细胞排列整齐,具有明显的表皮乳突及真皮乳头,表皮、真皮分界清楚,真皮层可见波浪状纤维组织,有序排列,均匀分布,ROS、NO、SOD、Hyp、MDA等指标接近甚至好于A1未照射组。
结论:a硫辛酸一定程度上能够抑制中波紫外线反复照射导致的皮肤光老化,对防治皮肤光老化具有积极作用。