附子生物碱对胃癌细胞株SGC-7901的抑制作用及其与化疗药物协同作用的实验研究

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研究目的:①附子生物碱对人胃癌细胞株SGC-7901体外增殖的影响;②附子生物碱体外对人胃癌细胞株SGC-7901侵袭能力的影响;③附子生物碱体外作用于人胃癌细胞株SGC-7901后对其细胞凋亡及周期的影响;④附子生物碱体外与氟脲嘧啶、奥沙利铂、多西紫杉醇之间的联合作用并初步探讨其作用机理。研究方法:①应用MTT检测法,检测不同浓度的附子生物碱体外作用胃癌细胞株SGC-7901不同时间后对其增殖的抑制作用;②采用Transwell小室法,观察不同浓度的附子生物碱对人胃癌细胞株SGC-7901侵袭能力的影响;③运用AnnexinV/PI双染色法检测不同浓度的附子生物碱对人胃癌细胞株SGC-7901凋亡的影响;④利用流式细胞仪检测附子生物碱对人胃癌细胞株SGC-7901周期的影响;⑤运用中效原理评价附子生物碱与氟尿嘧啶、奥沙利铂、多西他赛间的协同作用;⑥使用实时荧光定量PCR法检测附子生物碱对氟尿嘧啶、奥沙利铂、多西紫杉醇化疗疗效相关基因表达的影响。研究结果:①不同浓度(800、400、200、100、50μg/ml)的附子生物碱作用SGC-7901细胞24h、48h和72h后,对其增殖均有显著地抑制作用(P<0.01),并呈浓度和时间依赖性,抑制率最高达94.00%。②附子生物碱作用人胃癌细胞株SGC-790124h后,穿过transwell小室的细胞数量均较对照组显著减少(P<0.01),侵袭抑制率呈现浓度依赖性。③附子生物碱作用人胃癌细胞株SGC-790124h即出现明显的早期凋亡,并呈一定的浓度依赖性。④用不同浓度的附子生物碱处理SGC-7901细胞24小时后,细胞周期发生了很大的改变。与空白对照组相比,随着附子生物碱浓度的增加,S期的细胞比例逐渐增多,Go/G1期的细胞逐渐减少。⑤协同作用方面,附子生物碱联合氟脲嘧啶、奥沙利铂、多西紫杉醇对肿瘤细胞的抑制作用均高于单药给药组,且化疗药物相关基因的表达均明显下降。研究结论:①附子生物碱具有体外抑制人胃癌细胞株SGC-7901增殖的作用。②附子生物碱有降低人胃癌细胞株SGC-7901侵袭能力的作用。③附子生物碱有诱导人胃癌细胞株SGC-7901凋亡的作用,并阻滞细胞周期于S期。④附子生物碱与氟尿嘧啶、奥沙利铂、多西紫杉醇间存在一定的协同作用,其作用机制可能与下调相关基因的表达有关。
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