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目的：将真核表达载体p-LXSN-Akt1和p-LXSN-Akt2转染人胃黏膜上皮细胞系GES-1,观察Akt1和Akt2基因在体外对GES-1细胞生长及侵袭迁移能力的影响。方法：采用脂质体法将分别含Akt1和Akt2基因全长cDNA序列的p-LXSN-Akt1 (Akt1组)和P-LXSN-Akt2(Akt2组)质粒转染人胃黏膜上皮GES-1细胞,转染48小时后经抗生素G418筛选3周,挑取单克隆并扩增培养。以转染p-LXSN空质粒的细胞作为空载组,正常未转染细胞作为对照组。提取各组细胞的总蛋白,蛋白质印迹(Western blot)法检测转染后细胞Akt1、Akt2、CyclinD1和Mmp-2蛋白的表达水平；采用MTT法检测转染后细胞的增殖活性；应用流式细胞仪检测Akt1和Akt2基因转染对细胞周期的影响；Transwell法分析转然后细胞的侵袭能力；用免疫荧光法观察转染后GES-1细胞丝状肌动蛋白(F-actin)的变化。结果：1. p-LXSN-Akt1(Akt1(?)组)和p-LXSN-Akt2(Akt2组)质粒转染人胃黏膜上皮GES-1细胞后,Akt1和Akt2蛋白分别得到了高表达；Akt1组中CyclinD1和Mmp-2蛋白较空载组和对照组均高表达(P<0.01)；Akt2组中Mmp-2蛋白较空载组和对照组高表达(P<0.01), CyclinDl蛋白差异无统计学意义(P>0.05)。2.MTT法检测转染后细胞的增殖活性,Akt1组吸光度(A490)值于第1、2天分别与空载组和对照组比较差异无统计学意义,第3～6天差异均有统计学意义(均P<0.01)；Akt2组A490值于第1～6天分别与空载组和对照组比较差别均无统计学意义。3.流式细胞仪检测显示,Aktl组S期细胞数与空载组和对照组比较分别增多约20.00%和21.10%,G2期细胞数减少约20.80%和15.48%(均P<0.01)；Akt2组S期细胞数与空载组和对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。4. Transwell法分析细胞侵袭能力,与空载组和对照组比较,Akt1和Akt2组GES-1细胞侵袭能力均明显增加(P<0.01)。5.免疫荧光发现Aktl和Akt2组细胞丝状肌动蛋白F-actin的均聚集增加。结论：1.成功构建稳定高表达Akt1和Akt2的人胃黏膜上皮细胞GES-1细胞系。2.Aktl基因转染可促进GES-1细胞G1期到S期过度,其可以通过改变细胞周期促进GES-1细胞增殖；Akt2基因转染GES-1细胞后对细胞周期和增殖的影响不明显。3.Akt1和Akt2基因转染均可以通过增加GES-1细胞侵袭力和迁移力,可能促进GES-1细胞恶性转化。