PHA高产菌株的诱变选育及培养条件的研究

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聚羟基脂肪酸酯(PHA)是一类由微生物在非平衡营养下合成的胞内贮藏性高分子聚合物。它不仅具有高分子材料的热塑性、光学活性,还具有独特的生物可降解性和生物相容性,极有可能成为塑料的代替品来缓解严重的环境危机,从而日益备受关注。 PHA作为一种新型可降解性塑料,目前主要采用生物发酵法生产,此领域的研究多集中于对有价值菌株的筛选、菌种改造、发酵条件的优化等。因此,本研究以实验室保藏菌株Y-4为研究对象,采用紫外线及He—Ne激光复合诱变处理,获得优势变异菌株,针对该诱变菌株设计培养基,并优化其组分,以期获得能够用于工业化生产的高产菌株。实验结果如下: 通过紫外和He—Ne激光复合诱变,选育出诱变菌株BY-120-30。其细胞干重为13.2g/L,比出发菌株Y-4的细胞干重9.2g/L高出43.5%; PHA的量为7.0g/L比Y-4的PHA的量4.5 g/L高出55.6%;PHA提取率为53.0%比Y-4的PHA提取率48.9%高出8.4%。 摇瓶发酵条件的优化实验,确定了补料发酵的最佳条件为:2.5%蔗糖,0.3%蛋白胨,0.3%酵母膏,0.3%硫酸铵,0.5%氯化钠,pH为7。培养温度为30℃,接种量为10%,装液量为70mL/250mL,摇瓶转速为220rpm。在发酵培养12h时添加6mmol/L H2O2,得到细胞干重为15.8g/L,PHA的量9.7g/L,PHA提取率为61.4%。
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