斑马鱼胚胎绒毛膜剪切模量的测定和斑马鱼癫痫模型的建立

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癫痫病因其反复性即对大脑神经的严重危害性,一直是科研界和医学界的难题。而抗癫痫药物的耐药性和副作用让我们开发新的抗癫痫药物迫在眉睫。我们在实验中发现,在用PTZ(pentylenetetrazlole)处理后的胚胎,绒毛膜会有变硬的趋势。  在本课题的研究中,我们试图用PTZ诱导得到的癫痫模型,搭建计算机示踪系统,对斑马鱼癫痫模型的行为学进行研究,并且基本实现了抗癫痫前体药物或抗癫痫中药的筛选方法。通过PTZ处理4dpf(Days Post-Fertilization)的幼鱼,发现斑马鱼出现与正常野生型斑马鱼自由游动不同的一种病态运动。对其进行跟踪拍摄,数据统计,发现PTZ诱导的癫痫斑马鱼,一定时间内运动距离和平均速度大大提高,出现猝发性的癫痫反应。而通过vpa预处理过的斑马鱼,其运动距离和平均速度有所降低,促发次数有所减少。并且,vpa的抗癫痫作用在一定的浓度范围内是呈现浓度正相关。这从侧面证实我们通过行为学来检测和筛选抗癫痫药物的可行性。我们首次给出了癫痫的运动和时间的三维图,这有助于我们更为细致研究癫痫行为。此外,我们首次实现了用剪切模量的办法测量斑马鱼剪切模量的办法。我们通过剪切模量的测量来观测斑马鱼胚胎的软硬程度,并探讨了这与斑马鱼胚胎出膜率和死亡率的变化的关系。我们发现斑马鱼胚胎绒毛膜变硬,出膜率会有推迟现象,死亡率会升高。
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