分光光度法与EDTA滴定法对恒牙牙体硬组织钙,磷成分检测与分析

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目的:通过应用分光光度法和EDTA滴定法,比较年轻恒牙与成年恒牙牙体硬组织(牙釉质,牙本质)中Ca,p元素占牙体硬组织的含量,进一步分析其与牙齿酸蚀粘结之间的关系。方法:第一部分:取正畸拔出的双尖牙20颗,牙面无白班,裂纹,缺损,年龄12—14岁。正畸需要,或因牙周病而拔出的双尖牙20颗。年龄25—50岁。各分为两组,样本经清洗,清除牙冠,颈部牙石,菌斑,软组织,再风干,将普通石膏与水混合,待石膏将干之时,把牙垂直铸于其上,使牙齿颊面可见。同样方法制备年轻恒牙,成年恒牙各20个。待石膏完全凝固,将标本置于syj-200精密切割机上,调整好标准,切去颊面约1mm,取下即为釉质,再用切片机顺着切面切去颊面约1.5mm即为本质。接着用金刚砂车针除去切下本质中的多余釉质。分别称重,标记,将标本置于聚四氟乙烯消化罐中,标记,用移液枪取2ml65%超纯硝酸导入每个样品中。将每个聚四氟乙烯消化罐放于加热器上,缓慢加热至200%,使样品溶解于硝酸中。待样品完全溶解后,用洗瓶取适量milli—q水(超纯水)于每个消化罐中,将硝酸蒸发。蒸发至近干(呈油状),将消化罐从加热器上取下。待冷却后,用洗瓶冲洗消化罐,将里面的液体定容于100ml比色管中。取样本0.1ml定容于25ml试管中取2ml作为实验样品,用美国unico2000分光光度仪进行测量。采用计量资料两样本均数比较的t检验对资料进行统计学分析。第二部分:溶液制备同上,首先测定EDTA的浓度:准确称取0.15—0.2g基准锌片,加入约5ml(1+1)Hcl完全溶解后定容至250ml。用移液管吸取25.OOml Zn2+标准溶液于锥形瓶中加一滴甲基红,用(1+2)氨水中和溶液由红变黄。加20ml水和lOm1NH4+NH4CL缓冲溶液,再加4—5滴铬黑T指示剂立即用EDTA滴定,溶液由红色转变为蓝色即为中点,平行滴定3次,计算EDTA溶液的准确浓度。测量溶液中Ca总硬度:用移液管移取20.00ml-30.00ml实验溶液于250ml锥形瓶中,加入3ml三乙醇胺溶液,5ml氨水缓冲液再加入4—5滴铬黑T指示剂立即用EDTA滴定,溶液由红色变为蓝色即为中点平行测定3次计算水样总硬度xmg (CaCo3) L-1表示。采用计量资料两样本均数比较的t检验对资料进行统计学分析。结果:实验结果显示:1.牙釉质表层的钙,磷含量和Ca/P比值显示年轻恒牙釉质的矿化程度低于成年恒牙。具有统计学意义。P<0.052.牙本质的钙,磷含量和Ca/P比值显示年轻恒牙釉质的矿化程度低于成年恒牙。具有统计学意义。P<0.053.年轻恒牙与成年恒牙牙釉质钙.磷含量无差异(P>0.05)4.年轻恒牙与成年恒牙牙本质钙.磷含量无差异(P>0.05)结论:由于年轻恒牙的牙体硬组织Ca/P低于成年恒牙,p<0.05,具有统计学意义,显示年轻恒牙的矿化程度低于年轻恒牙有机物含量大于成年恒牙,更具有耐酸性。同样的酸蚀时间达不到粘结的最仕效果,因此对于年轻恒牙的酸蚀可适当加大时间,使釉质和本质形成足够多的微孔结构,这样有利于树脂粘结,但不要太长,太长会过多损坏牙釉质酸蚀后形成的微孔和牙本质酸蚀后形成的胶原网组织结构,不利于粘结修复。建议相对于成年恒牙釉质多酸蚀10秒,这对牙齿酸蚀粘结有一定的指导意义。
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