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目的:1.构建表达145位甘氨酸→精氨酸(Gly145Arg)变异的乙型肝炎病毒表面抗原(Hepatitis B surface antigen,HBsAg)真核表达质粒,用此质粒转染Hela细胞,建立稳定高效表达G145R HBsAg的细胞系并对该细胞系进行初步的性质鉴定.2.制备抗乙型肝炎病毒表面抗原的单克隆抗体(monocl onal anti body,mAb),筛选可以识别不同类型变异HBsAg的单克隆抗体.利用筛选出的抗-HBs单抗和多抗建立快速检测表面抗原变异的酶联免疫吸附实验(Enzyme-linked Immunosorbent Assay,ELISA)方法,并评价该方法与现有表面抗原检测试剂盒的检测灵敏度及检测变异表面抗原的效果.3.用5种抗-HBs的单克隆抗体及8种市售HBsAg检测试剂盒检测18种变异及野生HBsAg反应性,评价国产HBsAg检测试剂盒以及五种单克隆抗体检测变异HBsAg的效果,并对变异HBsAg的抗原性做初步分析.结论:1.成功建立了稳定表达G145R HBsAg的细胞系.该细胞系遗传性质稳定,表达蛋白产量高.此细胞系可用于G145R HBsAg的制备及纯化.2.成功制备了18株抗-HBs的单抗,其中四株可以较好识别变异HBsAg.利用D12F10E2和1C2建立了检测HBsAg的方法,该方法可以用于检测变异HBsAg,而且特异性与灵敏度达到了临床检测的要求,可以应用于变异HBsAg的检测.3.8种国产表面抗原检测试剂盒都不能很好的检出部分变异S蛋白,应扩大试剂盒应用的单克隆抗体范围,该室制备的4种单克隆抗体与15种变异HBsAg的检测有较好的反应性.