壳聚糖基纳米纤维亲和膜的制备及其蛋白质吸附性能研究

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近年来,亲和膜色谱在蛋白质的分离纯化中得到了快速发展,与传统的分离纯化方法相比,亲和色谱能够更高效,更经济地分离出目标蛋白质。本文提出了利用溶液喷射纳米纤维对进行改性,制备纳米纤维亲和膜,希望能得到一种蛋白质吸附性能更好的膜。  本课题选择具有生物可降解性的壳聚糖为主要材料。首先研究了以溶液喷射纺丝法为主要技术,采用戊二醛为交联剂的一系列具有水凝胶特点的壳聚糖/聚乙烯醇纳米纤维膜的纤维形态、溶胀性能、吸附性能。通过扫描电镜分析发现制备的纳米纤维直径分布在100nm~200nm范围内;通过对纳米纤维进行溶胀测试,所制备的纤维具有良好的溶胀性,其溶胀率在400%~860%的范围内;通过对纳米纤维进行BSA(牛血清白蛋白)的吸附性能测试发现CS/PVA比例为3∶1的纳米纤维膜的吸附量做大,能达到180μ g/mg。  为了提高纤维膜的强力及蛋白质的吸附性能,论文进一步采用同轴溶液喷射纺丝法制备了不同混合比例的具有皮芯结构的壳聚糖/尼龙6纳米复合纤维膜;然后,又分别用2-二乙氨基氯乙烷盐酸盐和汽巴蓝为亲和配基,从而得到用于提纯和分离蛋白质的纳米纤维亲和膜。通过扫描电镜分析发现制备的纳米纤维直径分布在145nm~900nm范围内;通过红外光谱分析,发现亲和配基成功的固载到纳米复合纤维膜上;通过对纳米纤维亲和膜进行BSA(牛血清白蛋白)的吸附性能测试发现,两种纳米纤维亲和膜都能提高蛋白质的吸附量。实验结果表明,DEAE-皮芯复合纳米纤维亲和膜的吸附量可达到343.51μ g/mg; F3GA-皮芯复合纳米纤维亲和膜的吸附量可达到300.197μ g/mg。综上,本研究所制备以溶液喷射纺壳聚糖/尼龙6纳米复合纤维膜为基材,以活性染料F3GA或者2-二乙氨基氯乙烷盐酸盐为配基的亲和膜体系,适合小规模化分离牛血清白蛋白。
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