自HIV病毒被发现以来，艾滋病在全球范围内的传播趋势日益严重，为科研和预防工作提出了严峻的考验。HIV-1 p24抗原的高灵敏度检测，在过去的十几年里得到了不断的改进和提高，并作为缩短窗口期、提高检测灵敏度的检测体系引入到了第四代抗体检测方法中去，为艾滋病的预防和检验，病毒感染情况的监测，艾滋病患者病情的控制及用药的效果研究都起到了应有的重要作用。 本课题将化学发光体系引入到p24抗原检测方法中来，以吖啶酯作为发光试剂，以双抗夹心法为原理，建立HIV-1 p24抗原的化学发光免疫分析方法。将检测灵敏度提高到fg级的水平；具有反应时间短，灵敏度高，操作简单，费用低廉，不影响抗原抗体生物学活性等优点。对于HIV-1 p24抗原检测方法的改进有很好的理论和实际意义。 本课题将吖啶酯作为化学发光试剂对抗p24抗体进行直接标记，标记比率为1.46。标记吖啶酯的抗体作为检测抗体同包被抗体一起组成了双抗夹心抗原检测体系，建立了基于吖啶酯标记抗体的p24抗原化学发光免疫分析方法。 为了进一步优化实验，本课题设计了一系列正交实验，对封闭蛋白及Tween-20去污剂的应用进行了深入的研究。其中，以牛血清白蛋白同酪蛋白进行比较，前者的封闭效果更为理想；在分析缓冲液中加入封闭蛋白将有利于减少非特异性信号；分析缓冲液中加入Tween-20，但在第三次洗涤的缓冲液中不加入Tween-20有利于较高信噪比。 此后，我们从方法学的角度对该方法进行了分析灵敏度、功能灵敏度、检测宽度等多方面的评价，并同常用的酶联免疫分析方法进行了比较。HIV-1 p24抗原吖啶酯化学发光免疫分析方法的功能灵敏度为0.5pg/ml，比普通的ELISA方法低1-2个数量级；分析灵敏度为0.5pg/ml；线性范围在0.5 pg/ml-100ng/ml，比普通的ELISA方法高1-2个数量级；HIV-1 p24抗原吖啶酯化学发光免疫分析方法与普通的ELISA检测方法具有很好的相关性，在P≤0.01情况下，相关系数为0.951。 同时，以HIV-1 p24抗原吖啶酯化学发光免疫分析方法为模型，我们对吖啶酯化学发光免疫分析方法的标准曲线拟合方式进行了探讨。选取了一元三次曲线、一元3/2次曲线、Logit-log曲线和四参数logistic曲线等四种拟合模型，通过R<2>值与信号值回代误差系数对四种方法进行综合比较，找出最为适合的拟合方式。从整体和局部两个方面进行综合分析，四参数logistic曲线拟合方式对于p24吖啶酯化学发光免疫分析方法的标准曲线拟合是最为理想的选择。