【摘 要】
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目的：探讨过度内质网应激在大鼠慢性环孢素A (Cy-closporine A, CsA)肾毒性模型细胞凋亡中的作用机制。方法：将Sprague-Dawley (SD)大鼠随机分为正常对照组和慢性CsA肾毒性组,
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目的：探讨过度内质网应激在大鼠慢性环孢素A (Cy-closporine A, CsA)肾毒性模型细胞凋亡中的作用机制。方法：将Sprague-Dawley (SD)大鼠随机分为正常对照组和慢性CsA肾毒性组,分别给予皮下注射橄榄油(1mL/kg/d,对照组)和CsA (15mg/kg/d,毒性组)1周及4周后处死大鼠。通过末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记测定法(TUNEL染色法)及Masson染色评估肾小管间质纤维化和细胞凋亡：使用免疫组化学染色和免疫印迹依次检测分子免疫球蛋白结合蛋白(Bip)、磷酸化的真核细胞翻译起始因子2α(elF2α)、生长抑制DNA损伤基因153(GADD15)、细胞凋亡相关基因caspase-12及caspase-3蛋白表达。结果：与对照组比较,CsA注射1周观察不到肾小管间质纤维化和TUNEL阳性细胞,而给予CsA注射4周大鼠表现为明显的肾小管间质纤维化[(38.9±3.3)%vs.(0.0±0.0)%,P<0.01]和大量TUNEL阳性细胞[(89±9)%vs.(7±2)%,p<O.01]。在分子水平上,与对照组比较,CsA注射组Bip和caspase-12蛋白的表达1周达到高峰,4周后降至正常水平；反之,elF2α、 GADD153、caspase-3蛋白表达呈时间依赖性的增加。结论：在慢性CsA肾毒性中,过度的内质网应激耗尽Bip,凋亡前途径中e1F2α、GADD153、caspase-12, caspase-3的激活导致肾小管上皮细胞凋亡参与肾小管间质损伤。
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