黄芪皂甙、丹参酮IIA对大鼠骨骼肌急性钝挫伤疗效的观察

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骨骼肌损伤是运动医学领域的常见病,修复后容易再次损伤。本研究将从组织形态学、生物力学和mRNA层面了解黄芪丹参复方制剂中的重要成分黄芪皂甙和丹参酮ⅡA对大鼠骨骼肌急性钝挫伤的作用效果。  第一部分,黄芪皂甙、丹参酮ⅡA对大鼠骨骼肌急性钝挫伤后骨骼肌组织形态的影响  目的:观察黄芪皂甙、丹参酮ⅡA对大鼠骨骼肌钝挫伤后骨骼肌组织形态的影响。  方法:84只雄性wistar大鼠随机分为六组,其中五个干预组(每组16只)和一个正常对照组(共4只)。用打击装置将干预组大鼠双侧腓肠肌中段造成钝挫伤模型,在损伤局部分别注射黄芪皂甙、丹参酮ⅡA、黄芪皂甙丹参酮ⅡA混合液、黄芪丹参混合液及生理盐水,分别于损伤后第4天、7天、14天和28天,进行双侧腓肠肌损伤部位取材。正常对照组于第28天进行双侧腓肠肌取材。经HE染色观察骨骼肌纤维直径(横断面),经Masson染色观察损伤处纤维疤痕组织面积(纵切面)。  结果:(1)各组不同时间点所测得的骨骼肌纤维直径无统计学差异。(2)各药物干预组纤维疤痕面积均较生理盐水组明显减小,黄芪皂甙丹参酮ⅡA混合组的纤维疤痕面积小于黄芪皂甙组和丹参酮ⅡA组,黄芪皂甙丹参酮ⅡA混合组与黄芪丹参组结果无统计学差异。  结论:在急性骨骼肌钝挫伤修复过程中,黄芪皂甙、丹参酮ⅡA对损伤部位骨骼肌纤维的直径没有明显影响,能减少损伤区域的纤维疤痕组织形成。  第二部分,黄芪皂甙、丹参酮ⅡA对大鼠骨骼肌急性钝挫伤后生物力学指标的影响  目的:观察黄芪皂甙和丹参酮ⅡA对大鼠骨骼肌急性钝挫伤后生物力学指标的影响。  方法:用打击装置将80只雄性Wistar大鼠右侧腓肠肌中段造成钝挫伤模型,随机分为五组,在损伤局部分别注射黄芪皂甙、丹参酮ⅡA、黄芪皂甙丹参酮ⅡA混合液、黄芪丹参混合液及生理盐水。于损伤后第14天、2l天、35天和56天,完整分离双侧腓肠肌,肌肉两端均带骨块。测试大鼠双侧腓肠肌的断裂强度和拉伸率,并将每只大鼠的伤侧数值与健侧数值之比作为参数进行统计学分析,比较各组大鼠的统计结果。  结果:(1)从伤后第21天开始,各干预组断裂强度比值均明显高于生理盐水组,黄芪皂甙丹参酮ⅡA混合组明显高于黄芪皂甙组和丹参酮ⅡA组,黄芪皂甙丹参酮ⅡA混合组和黄芪丹参组结果基本一致。(2)从伤后第21天开始,各干预组最大拉伸率比值均明显高于生理盐水组,黄芪皂甙丹参酮ⅡA混合组明显高于黄芪皂甙组和丹参酮ⅡA组,黄芪皂甙丹参酮ⅡA混合组和黄芪丹参组结果基本一致。  结论:在急性骨骼肌钝挫伤修复过程中,黄芪皂甙、丹参酮ⅡA能提高损伤骨骼肌的断裂强度和最大拉伸率,改善损伤骨骼肌的生物力学特性,但单方的治疗效果弱于其混合制剂和黄芪丹参复方制剂。  第三部分,黄芪皂甙、丹参酮ⅡA对大鼠骨骼肌急性钝挫伤后胚胎型肌球蛋白重链及波形蛋白mRNA表达的影响  目的:观察黄芪皂甙、丹参酮ⅡA对大鼠骨骼肌钝挫伤后胚胎型肌球蛋白重链(embryonicmyosinheavychain,MHC-emb)及波形蛋白(vimentin)mRNA表达的影响。  方法:用打击装置将120只雄性Wistar大鼠右侧腓肠肌中段造成钝挫伤模型,随机分为五组,在损伤局部分别注射黄芪皂甙、丹参酮ⅡA、黄芪皂甙丹参酮ⅡA混合液、黄芪丹参混合液及生理盐水。于损伤后第1、4、7、14、28和42天,取损伤处肌肉标本。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(realtimequantitativePCR)方法分析MHC-emb及波形蛋白mRNA的表达情况。  结果:(1)在骨骼肌急性钝挫伤修复早期,各组MHC-embmRNA和波形蛋白mRNA表达量均显著升高,分别于第7-14天和第4天达到高峰,然后下降。(2)各干预组MHC-embmRNA表达水平明显高于生理盐水组,黄芪皂甙丹参酮ⅡA混合组和黄芪丹参组更高于黄芪皂甙组和丹参酮ⅡA组。(3)各干预组波形蛋白mRNA表达水平明显低于生理盐水组,黄芪皂甙丹参酮ⅡA混合组和黄芪丹参组更低于黄芪皂甙组和丹参酮ⅡA组。  结论:在急性骨骼肌钝挫伤修复过程中,黄芪皂甙、丹参酮ⅡA能促进MHC-embmRNA表达,抑制波形蛋白mRNA表达,但其单方的疗效均弱于其混合制剂和黄芪丹参复方制剂。  
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