钝顶螺旋藻(Spirulina platensis)藻蓝蛋白的酶解及酶解产物的生物活性研究

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自由基过剩是机体衰老的主要原因,可引起多种疾病(如动脉粥样硬化、心血管疾病、脑神经细胞变性、糖尿病及肿瘤等)。目前,服用过多的合成抗衰老药物对人体有毒副作用。因此,寻求新的天然抗氧化剂、抗衰老药物对人类健康具有重要意义,海洋生物抗氧化剂因其抗氧化作用强、种类多、结构复杂、副作用低等优点成为人们研究的热点。研究表明,螺旋藻和藻胆蛋白具有抗氧化活性,能抑制机体内自由基积累,延缓机体衰老,抑制肿瘤的发生,并具有降血压活性。国外已有报道,从紫球藻中已得到具有明显降血压作用的活性肽。因此合理开发和利用螺旋藻及藻蓝蛋白提高其应用价值对人类抗衰老工程具有极其重要的意义。 本论文以钝顶螺旋藻(Spirulina platensis)及其所含的藻蓝蛋白为研究对象,围绕其高值化开发利用这一研究主题,进行了研究,结果如下: 采用胰蛋白酶酶解螺旋藻干粉的蛋白粗提液得到抗氧化、降血压活性增强的产物,提高了干藻粉的应用价值。螺旋藻粉粗提液经过两种不同的酶解方法进行酶解,酶解过程中光谱变化不同,但都能有效提高螺旋藻干藻粉抗氧化、降血压活性。一种方法反应体系为蛋白粗提液、胰蛋白酶、pH7.0磷酸盐缓冲体系,此方法酶解后,酶解产物在620nm处藻蓝蛋白特征吸收峰降低,但仍具有吸收和传递能量的功能,清除自由基能力与降血压活性增强,另一种方法反应体系为蛋白粗提液、胰蛋白酶、pH7.0磷酸盐缓冲体系、HCl、NH4HCO3,酶解产物在620nm处藻蓝蛋白特征吸收峰变化明显,几乎不具备吸收和传递能量的功能,自由基清除能力与降血压活性增强,且略高于前一种方法。酶解产物在620nm处的藻蓝蛋白的藻蓝胆素特征吸收峰发生变化,说明其生物活性功能与藻蓝蛋白结构变化有关,后面的藻蓝蛋白的酶解利用实验也证实了这一点。 与传统的藻蓝蛋白提取方法相比,本论文建立了藻蓝蛋白的制备型分离纯化方法,节省了纯化步骤,提高了纯化效率,为藻蓝蛋白的应用研究奠定了基础。
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