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目的:建立马尾松松针中木脂素类成分的质量控制方法,优选出马尾松松针木脂素类成分的最佳提取纯化工艺,为马尾松松针中发挥药效成分的进一步研究奠定基础。 方法:(1)以新木脂素A为对照品,采用紫外分光光度法测定马尾松松针50％乙醇回流提取物中总木脂素的含量,测定波长为281nm。(2)采用高效液相色谱技术对指标性成分massonianosideB[(7S,8R)-3’,9,9’-三羟基-3-甲氧基-7,8-二苯并呋喃-1’-丙基新木脂素-4-O-α-L-鼠李糖苷]进行含量测定,色谱条件如下:色谱柱:phenomenexSynergi4uHydro-Rp80A(250×4.6mm,5μm);流动相:乙腈-6%冰醋酸(13:87);流速:0.8mL·min-1;检测波长:281nm;柱温:30℃。(3)采用紫外分光光度法和高效液相色谱法分别测定总木脂素的含量和指标性成分massonianosideB的含量,以提取量为考察指标,用正交设计的方法优选最佳提取工艺。(4)运用X-5、AB-8、D101、D4006、NKA-Ⅱ、DiaionHP-20六种不同类型的大孔吸附树脂对马尾松松针中总木脂素进行富集纯化,以总木脂素和massonianosideB的含量以及总木脂素的吸附解析率为考察指标,筛选出最佳树脂类型,并对最佳树脂类型的纯化条件分别进行筛选。 结果:(1)总木脂素含量达到25.18%,在0～0.12mg/mL(r=0.9997)范围内呈良好的线性关系,平均回收率为96.06%,RSD=1.63%。(2)massonianosideB含量达到0.78%,在3.08～18.48mg/mL(r=0.9993)范围时呈良好的线性,平均回收率为100.03%,RSD=1.41%。(3)在提取工艺中,以总木脂素提取量为考察指标,确定最佳工艺为A3B2C3D3;以指标性成分为考察指标,其最佳工艺为A3B2C3D3。由于A因素三个水平无显著性差异,结合木脂素的理化性质,为了节约成本,适应工业大生产的需要,我们确定提取工艺为A2B2C3D3,即药材加10倍量的50%乙醇,回流提取3次,每次3h。(4)纯化工艺条件为:选用AB-8大孔吸附树脂进行纯化,马尾松松针提取物的上样浓度为40mg/mL,提取物与大孔吸附树脂比为100:7(mg/mL),吸附流速为1mL/min,树脂径高比为1:7,用2倍量柱体积水除杂,6倍量柱体积50%乙醇洗脱,洗脱流速为2mL/min。 结论:方法学考察表明,建立的马尾松松针中总木脂素和指标性成分massonianosideB的含量测定方法准确可靠。工艺验证结果表明,马尾松松针总木脂素的提取纯化工艺稳定可行。