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心肌短暂的缺血可以减轻心脏在随后遭受长时间持续缺血时的损伤程度，这种现象被称为缺血预处理。缺血预处理可分为两个阶段，第一阶段出现在预处理后1-3个小时，被称为早期保护作用；第二阶段即延迟性保护作用，出现在预处理后12-24个小时内，并可持续24-72小时。研究已发现，用药物激动心脏上的受体可模拟缺血预处理的延迟性保护作用，提示这种现象可为临床应用提供新的心脏保护手段。 本课题第一次应用人工合成的选择性κ阿片受体激动剂U50，488H在体激动大鼠心脏上的κ阿片受体，通过观察接受预处理后大鼠心脏在受到缺血／再灌注损伤时心肌梗死面积的变化，明确激动心脏κ阿片受体对心脏的延迟性保护作用。并通过观察心肌细胞内Ca2+稳态，线粒体产生ATP速率及热休克蛋白70表达的变化，探究其作用机制。同时，我们还运用两种ATP敏感性K+通道(KATP通道)的选择性阻断剂，观察这两种KATP通道在激动心脏κ阿片受体所引起的心脏延迟性保护中的作用。 第四军医大学博士学位论文 主要研究内容: 1.以离体大鼠心脏为观察对象，观察在体给予不同剂量的U50，488H后12一72小时，心脏在受到缺血/再灌注损伤时心肌梗死面积的变化，明确在体激动大鼠心脏上的K阿片受体是否能够产生延迟性保护作用，并绘制其剂量一效应与时间一效应曲线。 2.以分离的大鼠心肌细胞为观察对象，观察在体给予u50，488H后24小时，心肌细胞在受到模拟缺血的代谢抑制时，细胞内静息Ca2+浓度和电诱导的ca2+瞬变幅度的变化，探究预处理的细胞内作用机制。 3.以离体大鼠心脏为观察对象，以心肌梗死面积为观察指标，分别运用两种KATP通道，细胞膜KATP通道 （SraeK^TP通道）和线粒体K^T。通道（MitoK^TP通道），的选择性阻断剂，HMR一1 098和5一HD，明确这两种KATp通道在激动大鼠心脏K阿片受体所产生延迟性保护作用的触发过程及介导过程中的地位。 4.以分离的大鼠心肌细胞为观察对象，以细胞内静息Ca2+浓度和电诱导的Ca2+瞬变幅度为观察指标，运用HMR一1 098和5一HD，明确SraeKATP通道和MitoK盯P通道在激动大鼠心脏K阿片受体对心肌细胞内ca2+稳态所产生的影响中的作用，探究KATP通道参与心脏保护的作用机制。 5.以分离的大鼠心肌细胞线粒体为观察对象，以线粒体产生ATP的速率为观察指标，明确线粒体在在体激动大鼠心脏K阿片受体所产生延迟性保护中的作用。 6.以分离的大鼠心肌细胞线粒体为观察对象，以线粒体产生ATP的速率为观察指标，运用HMR一1 098和5一HD，明确KATP通道在激动大鼠心脏K阿片受体对线粒体功能影响中的作用。 7.运用western bzotting观察心肌细胞内热休克蛋白70 （HSP70）的表达，明确HSP70在在体激动大鼠心脏K阿片受体所产生延迟性保护中的作用。并运用HMR一1 098和第四军医大学博士学位论文5一HD，观察KATp通道和HSP7O在K阿片受体产生的延迟性保护作用中的相互关系。 获得的主要结果如下: 1.大鼠静脉给予3，5，20，15 mg/kg的U50，488H，可显著缩小心脏在遭受缺血/再灌注损伤时的心肌梗死面积。此作用在预处理后18小时出现，并于72小时消失。在U50，4 88H预处理前10分钟给予IOmg/kg的K阿片受体的选择性阻断剂nor一BNL此作用可被阻断。 2.大鼠静脉给予10 mg/kg的U50，488H，24小时后，分离的大鼠心肌细胞在受到模拟缺血的代谢抑制时，其细胞内静息ca2+浓度的上升明显减少，电诱导的ca2+瞬变幅度得以保持。此作用可被K阿片受体的选择性阻断剂nor一BNI所阻断。 3.在静脉给予USO，488H预处理大鼠的同时，用HMR一1098或5一HD阻滞SraeK;TP通道或MitoK^TP通道，U50，488H缩小心肌梗死面积的延迟性保护作用可被阻断。而用HMR一1 098或5一HD在U50，488H预处理大鼠后24小时，即心脏即将缺血前阻滞SraeK^TP通道或MitoK^TP通道，只有5一HD可阻断U50，488H缩小心肌梗死面积的延迟性保护作用。 4.在静脉给予USO，488H预处理大鼠的同时，用HMR一1098或5一HD阻滞SraeK;TP通道或MitoK^Tp通道，U50，488H保持心肌细胞内CaZ十稳态的延迟性保护作用可被阻断。而用HMR一1 098或5一HD在uso，4ssH预处理大鼠后24小时阻滞SraeKATP通道或MitoKATP通道，只有5一HD可阻断U50，488H保持心肌细胞内Ca2+稳态的延迟性保护作用。 5.大鼠静脉给予10 mg/kg的U50，4 88H，当24小时后心脏在遭受缺血/再灌注损伤时，其心肌细胞线粒体产生ATP的速率较未处理组明显恢复。此作用同样可被K阿片受体的选择性阻断剂nor一BNI所阻断。 6.在静脉给予U50，488H预处理大鼠的同时，用HMR一1098或5一HD阻滞SraeK^TP通道或MitoK盯P通道，U50，488H保持心肌细胞线粒体产生ATP速率的作用不受影响。而用 第四军医大学博十学位论文HMR一1 098或5一HD在U50，488H预处理大鼠后24小时阻滞SraeKATP通道或MitoK^TP通道，5一HD可减弱USO，488H保持心肌细胞线粒体产生ATP速率的作用。 7.大鼠静脉给予10 mg/kg的U50，488H，当24小时?