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目的:探讨组织工程学膀胱组织修复兔膀胱的组织学及功能研究,为组织工程学膀胱应用于临床的研究提供实验依据。 方法: (1)膀胱无细胞基质(BAMG)制备及细胞-膀胱无细胞基质复合物的构建:切取力克斯兔膀胱,分别应用:①酶消化法-去污洗涤法;②低压渗透法-酶消化法联合-83℃反复冻融法,制备膀胱无细胞基质,并用HE染色和透射电镜进行观察去细胞效果。将混合培养的第3代移行上皮细胞和平滑肌细胞种植在膀胱无细胞基质上,于1周及10天后取出细胞-支架材料,并做HE染色观察细胞在支架上的生长情况。 (2)无细胞基质组织工程学膀胱的组织学及功能的实验研究:膀胱无细胞基质组:用一半膀胱大小的膀胱无细胞基质对已行半个膀胱切除的力克斯兔行原位移植。假手术组:将力克斯兔切除一半膀胱,将切除的膀胱直接行原位缝合。术前、术后12周、术后24周时分别测定力克斯兔体重、膀胱最大压力、膀胱最大容量,并切取修补处的膀胱行HE染色和改良Marsland, Glees染色。 结果: (1)膀胱无细胞基质制备及细胞-膀胱无细胞基质复合物的构建:兔膀胱无细胞基质的HE染色和透射电镜未见细胞及细胞碎片,HE染色观察细胞-膀胱无细胞基质支架材料上未见细胞生长。 (2)两组缝补的材料均成功存活。①比较12周时将膀胱无细胞基质组及假手术组组间的体重、麻药用量(速眠新剂量)、最大膀胱内压力、最大膀胱容量、膀胱顺应性,无统计学差异(p>0.05);②比较24周时将膀胱无细胞基质组及假手术组组间的体重、麻药用量(速眠新剂量)、最大膀胱内压力、最大膀胱容量、膀胱顺应性,无统计学差异(p>0.05);③比较12周与24周时对膀胱无细胞基质组及假手术组的体重、麻药用量(速眠新剂量)、最大膀胱内压力、最大膀胱容量、膀胱顺应性,其中假手术组体重于两时间有统计学差异(p<0.05),24周时体重明显小于12周时体重,其余参数比较无统计学意义(p>0.05);④比较术前与12周时将膀胱无细胞基质组的体重、麻药用量(速眠新剂量)、最大膀胱内压力、最大膀胱容量、膀胱顺应性,无统计学差异(p>0.05);⑤比较术前与24周时将膀胱无细胞基质组的体重、麻药用量(速眠新剂量)、最大膀胱内压力、最大膀胱容量、膀胱顺应性,无统计学差异(p>0.05)。并于12周、24周切取假手术组和膀胱无细胞基质组修补部分膀胱,应用改良的Marsland,Glees方法染色均可见神经纤维,HE染色示:假手术组及膀胱无细胞基质组修补部分均可见移行上皮细胞、平滑肌细胞、神经纤维均有生长。 结论: (1)酶消化法-去污洗涤法、低压渗透法-胰酶消化法联合-83℃反复冻融法均可成功制备膀胱无细胞基质,混合培养的移行上皮细胞和平滑肌细胞未能与膀胱无细胞基质融合。 (2)膀胱无细胞基质(BAMG)作为膀胱移植物进行膀胱修补可吸收降解,上皮细胞、平滑肌细胞、神经纤维可在移植物支架上再生,可用做组织工程膀胱的支架材料进一步研究。