羊毛硫多肽（lanthipeptide）是一类由细菌核糖体合成，经翻译后修饰而形成的活性多肽。具有抑菌活性的羊毛硫多肽被称为羊毛硫细菌素(lantibiotics)。分子中具有含硫醚键的特殊氨基酸羊毛硫氨酸(lanthionine，Lan)与甲基羊毛硫氨酸（β-MethylLanthionine，MeLan）是羊毛硫多肽的主要特征。LanM是Ⅱ类羊毛硫多肽的修饰酶。它是一类双功能酶，具有脱水与环化活性。Bovicin HJ50是本实验室发现的一种由Streptococcus bovis HJ50产生的Ⅱ类羊毛硫多肽，其分子中含有两个MeLan与一个特殊的二硫键。BovM是bovicin H J50的修饰酶，具有N端脱水酶功能域与C端环化酶功能域。本研究着重对BovM的催化与底物结合机制进行了研究。　　本研究首先在体外重建了BovM的催化活性;并在此基础上，利用质谱考察BovM单功能域的重组蛋白的脱水或环化活性;然后利用表面等离子共振(SPR)来检测上述重组蛋白以及BovM中间序列(251-650)重组蛋白的底物结合活性。结果表明，BovM的含单功能域的重组蛋白具有一定程度的催化活性，但是活性很低;BovM单功能域的重组蛋白具有底物结合活性，但是亲和力下降较大，而BovM中间序列重组蛋白并不具有底物结合活性。由此，我们推测BovM中并不存在一个单独的底物结合域，而且BovM的整体结构对其行使正常的功能是必须的。序列比对结果表明，BovM含有约30个保守氨基酸。为研究这些保守氨基酸在BovM的催化与底物结合功能中所起的作用，本研究对这些保守氨基酸进行定点突变获得BovM的突变体蛋白，然后利用质谱与表面等离子共振(SPR)考察这些BovM突变体的催化与底物结合活性的变化。结果表明，BovM的保守氨基酸Asp155、His157、Arg393与Thr399对BovM的脱水功能中磷酸消除活性非常重要，;亲水氨基酸Asp247、Asn252、Glu266、Glu446、Tyr230与His249参与了BovM的脱水功能，但不参与BovM的底物结合;Lys175、Asp264与Gln495可能参与了底物自BovM上的正常释放;含疏水侧链的氨基酸残基Ile254、Leu290、Phe365与Leu597参与了BovM的底物结合，它们可能通过与底物前导肽分子中的疏水氨基酸相互作用来实现酶与底物的结合。结合上述结果，我们对BovM的催化与底物结合功能进行了阐释。本研究从酶的角度考察了BovM的催化与底物结合机制，丰富了对LanM家族的了解，为酶的定向改造以及底物的理性设计提供了理论依据。