虹鳟杂交及多倍体诱导的研究

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对鲑科大麻哈鱼属的虹鳟(Oncorhynchus mykiss)和红点鲑属的美洲红点鲑(Salvelinus fontinalis)进行杂交试验,获得四月龄虹鳟(♀)×美洲红点鲑(♂)鱼苗200尾,而虹鳟(♀)×美洲红点鲑(♂)杂交组合没有得到成活的后代。对虹鳟、美洲红点鲑及虹鳟(♀)×美洲红点鲑(♂)的F1子代的幼鱼时期形态学进行测量。除虹鳟和美洲红点鲑在腹鳍的分枝鳍条数目上存在差异外,三者之间在其余特征上均无差异(或有交叉)。2龄性成熟时,F1子代的特征和虹鳟完全相同,二者在色彩斑点、鳍条、体形、性成熟时间、卵质上均有别于美洲红点鲑。用蛋白质凝胶电泳法对虹鳟、美洲红点鲑及F1子代三个群体肌肉的八种同工酶进行电泳发现:F1子代肌肉的磷酸甘油醛脱氢酶(α-GPD)、乳酸脱氢酶(LDH)、磷酸葡萄糖变位酶(PGM)、苹果酸脱氢酶(MDH)、异柠檬酸脱氢酶(IDH)、苹果酸酶(ME)六种同工酶电泳图谱与虹鳟的电泳图谱极其相似,而明显不同于美洲红点鲑的电泳图谱。表明虹鳟(♀)×美洲红点鲑(♂)的F1子代为雌核发育类型。对高水温和静水压诱导的四倍体试验组的单个胚胎进行了染色体标本的制作。其中高水温四倍体诱导组的四倍体率为5.6%;用静水压处理组中四倍体率为22.8%。其中人工授精后5小时40分钟处理组得到的四倍体率最高,为27.3%。从一龄的5458尾试验鱼中检出四倍体15尾。用四倍体雄鱼和二倍体雌鱼杂交的后代全为三倍体。对虹鳟(♀)×美洲红点鲑(♂)杂交组合进行三倍体诱导试验。杂交三倍体诱导组的发眼率、四月龄成活率均高于普通杂交对照组。使用胚胎时期受精卵进行染色体标本制作,得到该组合三倍体的诱导率为93.3%。三倍体虹鳟的平均红细胞长径、核长径及核体积分别为19.9μm、9.2μm、75.7μm3,二倍体虹鳟的平均红细胞长径、核长径及核体积分别为14.9μm、6.9μm、51.3μm3,二、三倍体间呈极显著差异。三倍体虹鳟的红细胞数(RBC)和红细胞比积(HCT)明显低于二倍体,而红细胞平均容量(MCV)显著高于二倍体。此外,虹鳟三倍体白细胞中的淋巴细胞绝对值(LYM)、中间细胞绝对值(GRN)和中性粒细胞绝对值(MID)都显著高于二倍体(P<0.05)。用扫描电镜对二、三倍体虹鳟精子进行观察。虹鳟二倍体产生的单倍体(n型)精子头部的体积大小在3.4~7.6μm3之间。根据单倍体的精子大小可把三倍体虹鳟的精子大致分为三类:n型精子、2n型精子和3n型精子,比例分别为55.3%、34.2%和10.5%。
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