胃癌是我国常见的恶性肿瘤，探讨胃癌药物预防和治疗的机制，将为胃癌的临床治疗提供新的思路。过氧化物酶体增殖因子活化受体（PPARs）是一组核激素受体，与配体结合可启动核内靶基因的转录。PPARs处于多种信号转录途径的交叉点，与多种代谢性疾病和肿瘤密切相关。PPARγ是PPARs家族成员之一，与其他成员相比其生物学功能更复杂。近年研究发现，PPARγ必须与另一组核受体超家族成员——维甲酸x受体α（RXRα）结合成异源二聚体（PPARγ/RXRα）才可以发挥识别目的基因的作用。PPARγ在脂肪肉瘤，乳腺癌，结肠癌，肺癌等肿瘤组织和细胞系中有较高水平的表达。以PPARγ合成配体药物及维甲酸类配体诱导肿瘤分化和凋亡，是近年来肿瘤治疗研究的方向。传统的恶性肿瘤化疗方法由于药物负作用较大，应用受到较大限制，PPARγ配体及维甲酸类配体的应用能实现以高效、低毒的选择性药物治疗肿瘤。近年来，COX-2与肿瘤的关系越来越受到人们重视，COX-2蛋白质及mRNA水平在结肠腺癌、胃癌、胰腺癌和肺癌中表达较正常组织高，而COX-1表达无明显改变。应用COX-2抑制剂NSAIDs可抑制人或实验动物结肠癌、乳腺癌、胰腺癌、胃癌和肺癌的发生。有研究提示，一些第四军医大学硕士学位论文COX2的抑制剂同时又是 PPAR的激活剂，两者在肿瘤发生和演进中的相互作用关系有待进一步研究。 本文旨在初步探讨 PPAR和 RXRa在胃癌组织及细胞系中蛋白和ltllltriA水平的表达，研究 PPARY和 RXRa被配体药物激活后对胃癌细胞生长及增殖特性的影响，并进一步分析 PPAR和 RXR配体药物对转染hCOX2反义核酸基因的胃癌细胞的增殖、细胞周期、前列腺素合成和体内致瘤性的影响，以寻找PPAR和COX上在胃癌中的关系。 其主要内容及结果如下：1．免疫组织化学提示，PPAR和RXRa在胃粘膜不典型增生及胃癌中的表达率显著高于慢性胃炎组o＜0．05、P＜0．01人从慢性胃炎、胃粘膜不典型增生到胃癌，PPAR和yRa表达率有上升趋势，二者表达率与胃癌有无淋巴结转移及胃癌的分化程度无相关性。胃癌中 PPAR和 M表达呈显著正相关。（二0．54，P＜0，01）2．免疫细胞化学和 Weste。blot检测提示，胃癌细胞系 SGC7901、M洲45、MGC803、AGS中均有PPARY和RXRa蛋白表达；其中P叭蛋白表达强弱依次为 MKN45＞MGC803＞SGC7901＞AGS，RXRa蛋白表达强弱则依次为＊＊0901＞＊KN 45＞＊＊“03＞＊OS。3．半定量RT干CR提示，PPARY和RXRa在m删A水平表达强弱均依次为＊KN忙＞＊＊凹901＞＊＊S＞＊＊“03。4．MTT法检坝显示：配体 15－d－PG人、calitazone、BRL49653和 9－ets－RA对 PPARY和 RXR高表达的 M洲45及低表达的 AGS生长均有显著抑制作用o＜O．m或P＜ooj），且呈剂量依赖性；联合两种配体药物对胃癌细胞的抑制有协同作用；且抑制作用的强弱与 PPAR和 RXRa蛋白在胃癌细胞中表达的高低有关系。5．利用上述四种配体处理转染hCOX二反义核酸的SGC7901细胞吓 －3－Gastroenterology Institute一AS习 及其亲本细胞吓F未转染的SGC7901）。勺增殖实验进一步证实 MTT检测结果，且显示：配体对亲本细胞增殖的抑制作用强子AS－SGC7901细胞。提示 COX－2基因被封闭后影响了配体激活 PPA．－－－xPA．－－－x后对肿瘤细胞增殖的抑制作用。6．流式细胞仪分析显示：SGC79m妻月GI期占56）％，经P PAPA幻配体 BRL49653处理后，SGC7901和 AS－SGC7901细胞的＊ 期分别为 79．4％和 66．1O。提示配体 BRL49653活化 PPARY后，使肿瘤细胞倍增时间延长，大部分停滞子GI期；用反义核酸封闭COXZ基因后，BRL49653对胃癌细胞周期的抑制作用则被削弱，这种抑制作用可能部分依赖于COX－2的表达。7．放免法检测细胞 PGEZ释放显示：经 B肚49653和 CCICCOxib处理后，SGC7901的PGEZ的触浓度均显著低于未处理组（P＜0．05），联合两种药物组与 celecoxib tA细胞PGEZ释放无显著性差异，但与 B肚49653组有显著性 差异（P＜0．01）。AS－SGC7901与 SGC7901 细胞均经 B皿49653处理后，前者的 PGE。释放浓度显著低于后者，说明 COX《可能是PPARPAR作用的下游分子，二者经同一途径对PGEZ的合成进行负性调节，COX上基因的表达量影响 PPARY对前列腺素释放的调节。8．裸鼠致瘤性实验显示：接种亲本细胞裸鼠口饲Bgy49653和celecoxib后，肿瘤体积均显著小于未给药组（P＜0．of或 P＜0．0 5），联合用药组肿瘤体积＊、子单独给药组，但统计学差异不显著。接种ASS 细胞裸鼠与接种SGC7901裸鼠口饲BRL49653后，后者移植瘤体减小更明显。提示 PPARY配体与 COX2选择性抑制剂均能抑制胃癌细胞在体内的生长；二者无明显协同作用；PPARY活化后对肿瘤的抑制作用可能与COX－2有关。 以上实验表明：＊助N和RX Ra在胃癌及胃癌前病变中表达上调， －4－Gastroenterology Institule