背景:EGFR是表皮生长因子受体(HER)家族成员之一,其信号通路在细胞的生长、增殖以及分化等生理过程发挥重要的作用。研究表明在多种实体肿瘤中存在EGFR基因突变以及EGFR蛋白水平的高表达或异常表达。EGFR与肿瘤细胞的侵袭、转移能力密切相关,而其机制尚未完全阐明。黏附分子CD44是粘附家族中一个重要成员,可介导细胞与细胞、细胞与细胞外基质间的黏附作用,在多种恶性肿瘤中高表达,同时在肿瘤细胞的干性、侵袭、转移方面发挥重要作用。既往在头颈部肿瘤的研究中发现,EGFR信号通路与CD44之间存在交叉关系,并协同影响肿瘤进展。但二者在肺腺癌患者中是否也存在相关性并发挥何种作用目前尚不完全清楚。遂本研究欲探讨CD44与EGFR表达水平之间是否具有相关性,其临床意义,以及CD44是否受EGFR信号通路调控。方法:1应用瞬时转染技术在两株肺腺癌细胞系A549、H1975中降表达(siRNA)及过表达(质粒)EGFR,RT-PCR、Western blot检测CD44表达水平的变化。2应用NCBI,分析肺腺癌组织中EGFR基因在癌和癌旁的表达差异;选取肺腺癌组织及癌旁正常组织,应用Western blot及免疫组化方法检测肺腺癌组织及癌旁正常组织中EGFR的蛋白表达水平。3采用扩增阻滞突变系统技术(amplified refractory mutation system,ARMS)测定其EGFR突变情况。4应用TCGA数据库资料,分析肺腺癌组织中EGFR和CD44基因水平的相关性。并通过免疫组化方法检测EGFR基因突变与非突变组织中CD44的表达水平。5收集病人的病例资料,分析CD44的表达水平与临床病理参数之间的关系。结果:1 EGFR信号通路可调控CD44表达。在A549、H1975细胞系中,采用小干扰RNA降表达EGFR后,CD44表达下调;过表达质粒升表达EGFR后,CD44表达上调。2 EGFR基因及蛋白在肺腺癌组织中高表达。通过分析NCBI数据库资料(GSE19804)发现,60例配对肺癌的癌和癌旁组织中,EGFR基因在癌组织中的表达水平明显高于癌旁(P<0,0001);同时,我们选取本院8对肺腺癌的癌和癌旁组织,采用Western blot方法检测EGFR表达水平,发现癌组织中EGFR蛋白的表达明显高于癌旁正常组织;通过对82例肺腺癌组织标本进行免疫组化染色发现,EGFR的表达在腺癌组织中表达多为阳性,而对应的癌旁正常组织不表达或者是弱表达。3肺腺癌中存在EGFR基因突变。采用扩增阻滞突变系统技术测定82例肺腺癌EGFR突变情况,其中54例存在EGFR突变,EGFR突变阳性率65,9%,其中28例为19外显子缺失突变,25例为21外显子L858R突变,1例为18外显子突变。4 EGFR基因突变的肺腺癌组织中,其蛋白表达水平明显高于非突变组织。选取本院4对EGFR基因突变与非突变肺腺癌组织,通过RTPCR-琼脂糖凝胶电泳方法及Western blot方法比较两组组织中EGFR基因和蛋白的表达差异,发现EGFR基因突变组织中EGFR基因和蛋白表达水平均高于非突变组织。通过对82例肺腺癌组织标本进行免疫组化染色发现,EGFR突变组织中EGFR蛋白表达水平高于非突变组织(=10,108,P<0,01)。5肺腺癌组织中EGFR与CD44表达水平正相关。通过分析TCGA数据库发现,522例肺腺癌组织组织中EGFR和CD44基因水平表达呈正相关,相关系数为0,27(P<0,05);通过对82例肺腺癌组织标本进行免疫组化染色发现,EGFR和CD44基因水平表达呈正相关,相关系数为0,31(P=0,01),进一步分析发现,EGFR基因突变组CD44蛋白表达水平高于非突变组(=8,732,P<0,05)。6 CD44蛋白表达水平与临床病理参数的关系。CD44表达水平与淋巴结转移、肿瘤分期、及肿瘤分化程度正相关,与年龄、性别、是否吸烟、肿瘤大小无关。结论:1在肺腺癌细胞系中,CD44的表达可能受EGFR信号通路调控。2肺腺癌组织中EGFR基因及蛋白表达水平较癌旁正常组织明显增高;约2/3的肺腺癌存在EGFR基因突变,其中19和21号外显子突变覆盖突变的90%以上。且该突变导致EGFR基因和蛋白的高表达。3在肺腺癌组织中EGFR与CD44在基因和蛋白表达水平均为正相关;且在EGFR突变肺腺癌组织中,CD44蛋白表达水平明显升高。4肺腺癌组织中CD44的表达水平与肿瘤分化、TNM分期、淋巴结受累情况相关。