论文部分内容阅读
目的观察高渗透压对兔髓核细胞活性的影响及JNK/SAPK、P38信号转导通路在此过程中的作用。方法不同渗透压及时间段处理髓核细胞后采用MTT实验检测细胞活性并运用流式细胞仪检测髓核细胞凋亡情况,同时利用免疫荧光和Western blot技术检测磷酸化P38丝裂原活化蛋白激酶(Phospho-P38mitogen-activated protein kinases, P-P38MAPK)、磷酸化JNK/SAPK激酶(Phospho-c-Jun N-terminal kinases/Stress-activated protein kinases, P-JNK/SAPK)的亚细胞定位及表达水平,观察其对髓核细胞凋亡的影响。结果高渗透压(600m0sm)可导致髓核细胞显著凋亡及P-P38MAPK. P-JNK/SAPK蛋白表达水平改变。600m0sm各实验组凋亡细胞均与对照组有明显统计学意义(P<0.01),相应阻断组凋亡细胞明显减少,400m0sm各实验组和阻断组凋亡细胞与对照组相比均无明显差异;免疫荧光结果显示P-P38MAPK、P-JNK/SAPK在髓核细胞质和细胞核中均有表达;经高渗透压(600m0sm)压刺激后P-P38MAPK、P-JNK/SAPK表达均显著高于对照组(P<0.01),而相应阻断组P-P38MAPK、P-JNK/SAPK表达均显著降低。结论高渗透压通过激活JNK/SAPK、P38信号转导通路导致体外培养的兔髓核细胞凋亡,同时髓核细胞对轻度的渗透压升高具有一定的适应性。