【摘 要】
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毛细血管扩张性-共济失调症(ataxia-telangiectasia,AT)是常染色体退行性疾病,对AT细胞及ATM基因的研究表明,其在细胞DNA损伤监视网络中发挥着重要的DNA损伤识别及信号转导作
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毛细血管扩张性-共济失调症(ataxia-telangiectasia,AT)是常染色体退行性疾病,对AT细胞及ATM基因的研究表明,其在细胞DNA损伤监视网络中发挥着重要的DNA损伤识别及信号转导作用,在生殖细胞成熟和免疫细胞生成过程中也发挥着不可缺少的作用.克隆、表达该基因在研究其功能的基础.其C末端PI--3K激酶结构域能代替ATM部分功能.通过人外周外血来源的Marathon-ReadyTM cDNA Kit及Advantage cDNA polymerawe Mix,由LD-PCR扩增到9kb人全长cDNA,1.2kb含PI--3K激酶结构的ATM cDNA片段,以及4.7kb含亮氨酸拉链及脯氨酸拉链及脯氨酸富含区结构域的ATM cDNA片段,为进一步研究ATM作用机制打下基础.将ATM PI--3K激酶域cDNA克隆至pcDNA3.1--T载体,再将其亚克隆至表达载体pET21a(+),序列分析证实插入外源基因正确.诱导外源基因在大肠杆菌中表达,表达产物C末端含有6×His纯化标签为表达产物分离纯化打下基础.
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