表皮生长因子受体抑制剂联合X线照射对人宫颈癌的体外实验研究

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[目的]:观察表皮生长因子受体抑制剂尼妥珠单抗(泰欣生、h-R3)联合放疗对人宫颈癌细胞系(He la);的增殖抑制和诱导细胞凋亡的作用,及其对细胞周期的影响,为表皮生长因子受体抑制剂对宫颈癌放疗增敏的可行性提供实验依据。[方法]:四噻唑蓝对比色试验(MTT)观察不同浓度的表皮生长因子抑制剂对宫颈癌Hela浓度时间抑制作用,计算出最适浓度。四噻唑蓝比色试验(MTT)观察表皮生长因子受体抑制剂联合放疗对宫颈癌Hela细胞时间抑制作用,流式细胞术Annexin V/PI双染法检测对宫颈癌Hela细胞凋亡和周期的影响。[结果]:1.经表皮生长因子受体抑制剂处理后,用倒置显微镜观察h-R3处理后的宫颈癌细胞,发现随药物及作用时间的增加,宫颈癌Hela细胞逐渐变圆浮起,折光度降低,细胞间连接松散,增殖减慢。2.MTT法检测不同浓度的h-R3在不同时间点对宫颈癌Hela细胞的增殖抑制作用:不同浓度h-R3作用于宫颈癌Hela细胞,随着抑制剂作用浓度增加、作用时间的延长,肿瘤细胞存活率逐步降低。3.h-R3浓度50ug/ml,单次放疗剂量2Gy时,联合治疗对宫颈癌Hela细胞的作用最强,联合作用比单独用药或者单独放疗强。4. Annexin V/PI双染色法流式细胞仪检测凋亡情况:h-R3浓度50ug/ml,单次剂量2Gy,作用72h后,对照组细胞凋亡率仅为0.06%,h-R3联合照射组细胞凋亡率为9.07%。5.PI染色法流式细胞仪检测细胞周期变化情况:人宫颈癌细胞Hela凋亡率与G2/M期百分率呈负相关,即h-R3增加了细胞G2/M期的放射敏感性。[结论]:1.表皮生长因子受体抑制剂尼妥珠单抗(h-R3)联合放疗对人宫颈癌细胞系(Hela)存在放疗增敏作用,联合作用比单独用药或者单独放疗强。2.表皮生长因子受体抑制剂尼妥珠单抗(h-R3)对人宫颈癌细胞系(Hela)的抑制作用主要作用于G2/M期。
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