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摄食量是影响鱼类生长和发挥生产性能的重要因素,鱼类的摄食由一系列食欲刺激和抑制因子共同调节。生长激素释放肽(ghrelin)、胆囊收缩素(CCK)、神经肽Y(NPY)在鱼类的摄食调控中发挥着重要的作用。为了了解这三种多肽在团头鲂摄食调控中的作用机制,本研究克隆获得了团头鲂(Megalobrama amblycephala) ghrelin、NPY和CCK基因的cDNA全长序列,并通过荧光定量PCR方法,构建了三种基因的时空表达谱,研究了饥饿及再投喂处理对这三个基因表达的影响。主要研究结果如下：1.团头鲂ghrelin、NPY和CCK基因的cDNA全长序列的克隆与分析团头鲂ghrelin基因cDNA全长494bp(GenBank No. JQ301476),包含一个59bp的5’-非翻译区,一个123bp的3’-非编码区序列,以及一个长312bp的开放阅读框(ORF),编码103个氨基酸。团头鲂ghrelin氨基酸序列与草鱼氨基酸序列完全致,与齐口裂腹鱼、金鱼和斑马鱼相似性分别为92%、88%和71%。团头鲂NPY基因cDNA全长760bp (GenBank No. JQ301475),包含一个65bp的5’-非编码区,一个404bp的3’-非编码区序列,以及一个长291bp的ORF,编码96个氨基酸。对团头鲂NPY基因编码的氨基酸序列进行同源分析显示,团头鲂NPY氨基酸序列较为保守,其中与草鱼、鲤NPY氨基酸序列完全一致,与其它脊椎动物相似性也较高。团头鲂CCK基因cDNA全长770bp (GenBank No. JQ290110),包含一个49bp的5’-非编码区,一个309bp的3’-非编码区序列,以及一个长372bp的ORF,编码123个氨基酸。对团头鲂CCK基因编码的氨基酸序列进行同源分析显示,团头鲂CCK氨基酸序列与草鱼氨基酸序列相似性达98%,与其它脊椎动物相似性较低。2.团头鲂ghrelin、NPY和CCK基因时空表达谱的构建采用荧光定量PCR方法,检测了团头鲂早期发育阶段、成鱼不同组织中ghrelin、NPY和CCK基因的表达。结果显示,在团头鲂早期发育阶段,ghrelin、NPY和CCK基因在受精卵至出膜后50d的各个发育时期均有表达,且胚后发育阶段的表达水平均明显高于胚胎发育阶段。在胚胎发育阶段,ghrelin基因相对表达量始终较低,无显著变化(P>0.05)；NPY基因相对表达量呈先升后降的波动趋势；CCK基因表达量呈下降趋势,但无显著差异(P>0.05)。在胚后发育阶段,ghrelin和NPY基因相对表达量在出膜后第1、3、5d上升,CCK基因相对表达量在第3d出现显著下降。三种基因的相对表达量在出膜后30d内变化明显。团头鲂ghrelin、NPY和CCK基因在检测的12种组织中均有表达。Ghrelin基因在肠道中表达量最高,且从前肠到后肠表达水平依次升高；NPY基因主要在脑中表达,在下丘脑表达水平最高；CCK基因也主要在脑中表达,在垂体中表达量最高。3.饥饿及再投喂对团头鲂ghrelin、NPY和CCK基因表达的影响本实验采用荧光定量PCR方法检测了饥饿15d及再投喂15d对团头鲂ghrelin、NPY和CCK基因表达的影响。结果显示,团头鲂脑中ghrelin基因表达量在饥饿后上升,恢复投喂后下降；肠道中ghrelin基因表达量在饥饿后上升并在7d达到最高值,再投喂7d后恢复到对照组水平。团头鲂脑中NPY基因表达量在饥饿后上升,恢复投喂后4d下降到对照组水平；肠道NPY基因表达量无显著变化(P>0.05)。团头鲂脑和肠道中CCK基因表达量均在饥饿后4d下降到最低水平,再投喂7d后恢复到对照组水平。