【摘 要】
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目的探讨Apobec-1互补因子(A1CF)在C57BL/6小鼠肾脏中的表达,以及A1CF对肾小管上皮细胞上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)过程的影响,初步阐明A1CF在哺
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目的探讨Apobec-1互补因子(A1CF)在C57BL/6小鼠肾脏中的表达,以及A1CF对肾小管上皮细胞上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)过程的影响,初步阐明A1CF在哺乳动物肾脏中可能的生物学功能。方法1.利用整胚原位杂交实验检测A1CF在C57BL/6小鼠肾脏发育过程中的表达情况;利用切片原位杂交实验检测A1CF在成年C57BL/6小鼠肾脏中的具体表达部位。2.在大鼠肾脏近曲小管上皮细胞NRK52e中过表达A1CF,利用western-blot及免疫荧光实验检测该细胞的上皮-间质转化过程中相关标志蛋白的变化;利用细胞划痕实验测定该细胞迁移能力的改变。3.采用人工合成的A1CF-rat-siRNA敲低NRK52e细胞内源性A1CF表达,利用western-blot及免疫荧光实验检测该细胞的上皮-间质转化过程中相关标志蛋白的变化;利用细胞划痕实验测定该细胞迁移能力的改变。结果1.原位杂交结果显示A1CF在C57BL/6小鼠肾脏发育早期不表达,自胚胎期15.5天开始表达,并且在成年肾脏中集中表达在肾小管中。2.在大鼠肾脏近曲小管上皮细胞NRK52e中过表达A1CF抑制了该细胞的上皮-间质转化过程及细胞迁移能力,A1CF的两种剪切变体(A1CF/A1CF(-8AA))在上述过程中具有相似的作用。3.利用A1CF的siRNA敲低NRK52e细胞中的A1CF促进NRK52e细胞的上皮-间质转化过程及细胞迁移能力。结论我们的研究首次发现A1CF在肾脏发育晚期开始表达并集中表达在肾小管中,此外,我们还发现A1CF可抑制大鼠近曲小管细胞的上皮-间质转化过程及其迁移能力。
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