背景及目的:　　白藜芦醇（RSV,3,4′,5-trihydroxy-trans-stilbene）即反式3,4’，5-三羟基茋，为二苯乙烯类化合物，以游离态和糖苷结合态两种形式存在于虎杖、葡萄、花生等多种植物中，其中以虎杖中含量最为丰富。是一种重要的植物抗毒素。白藜芦醇具有多种药理活性，如抗菌、抗氧化、抗癌、抗血小板凝聚、抗艾滋病毒活性等，能修复非典型肺炎方剂所致的细胞DNA损伤，尤其对人类健康的大敌———肿瘤和心脏病的治疗和预防有明显的作用。随着白藜芦醇的广泛应用，针对白藜芦醇生物活性及其作用机制的研究日趋深入。已有大量研究表明白藜芦醇的抗肿瘤作用主要是通过诱导细胞死亡，最近也有研究证明白藜芦醇能诱导不同种类的细胞发生自噬，并且进一步的研究证实了细胞的自噬与死亡是存在相互关系的，即自噬性死亡。本实验以人肺腺癌细胞株A549细胞作为研究对象，重点对白藜芦醇诱导该细胞死亡的糖酵解机制进行了深入的研究。　　材料和方法:　　用含10％超级新生牛血清的DMEM培养基体外培养人肺腺癌A549细胞，再用含不同浓度白藜芦醇的培养基处理，倒置相差显微镜观察A549细胞的形态学变化；MTT法检测细胞存活率；Western Blotting对糖酵解关键酶（Glut1、G6PD、PGAM、HK1、HK2）和相关通路蛋白等进行检测；通过PCR检测相关基因（Glut1、G6PD、HK1、PGAM）的表达；G6PD测定试剂盒检测G6PD酶活性的变化；葡萄糖氧化酶法测定培养基中葡萄糖含量；乳酸脱氢酶的紫外酶动力学法测定培养基中乳酸的含量；全波长荧光酶标仪测定ROS的变化；RNA干扰技术分析信号传导通路。　　结果:　　1．形态学观察，在低剂量RSV作用下，细胞生长情况良好，外形饱满，体积变大，而随着RSV浓度不断增加，死亡细胞数也逐渐增加，细胞皱缩，呈不规则形状。同时DAPI染色观察细胞核发现细胞核明显皱缩，核固缩。　　2．MTT法检测，不同剂量的RSV对野生型肺腺癌A549细胞有不同程度的杀伤作用，这种作用呈剂量和时间依赖性关系，经过计算RSV作用24h IC50为100μM，48h IC50为54μM。　　3．线粒体膜电位检测随着白藜芦醇浓度不断增加（0μM、25μM、50μM、100μM、200μM）， A549细胞线粒体膜电位不断下降。　　4．流式细胞术结果显示RSV处理A549细胞48h，H2O2和O2-的量逐渐增加，而到了48h后略有下降。　　5．不同浓度、时间梯度白藜芦醇分别作用A549细胞后，培养基中的葡萄糖与乳酸含量检测结果显示随着白藜芦醇浓度加大，培养24h后细胞消耗葡萄糖的量逐渐减少，产生乳酸量也呈逐渐降低的趋势；相反随着100μM白藜芦醇处理A549时间不断延长，培养基中葡萄糖含量不断下降，而乳酸含量不断上升，但是用RSV处理组的葡萄糖下降与乳酸生成速率都要低于未处理组。　　6．Western Blotting检测糖酵解关键件酶显示，Glut1、PGAM、HK2表达下降，而G6PD上升，HK1则没有明显变化。　　结论:　　1．RSV能在一定浓度范围内在体外抑制A549细胞生长和增值，并且这种作用呈时间和剂量依赖关系。　　2．RSV能一定程度抑制细胞对葡萄糖的摄取。　　3．0~100μM RSV诱导A549细胞产生ROS，并且ROS具有促凋亡的作用，这与线粒体凋亡通路有关。　　4．0~100μM RSV使G6PD活性增加，有可能RSV抑制了细胞糖酵解途径而转向PPP途径。　　5．ROS激活p53可能会对糖酵解途径与PPP途径产生抑制从而使细胞产生ATP量减少，模拟饥饿或能量限制，诱导细胞死亡。