VitD受体介导植物雌激素调节骨代谢效应的细胞学和分子流行病学研究

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目的:绝经后骨质疏松症(Postmenopausal osteoporosis,PMOP)是由于妇女在生理性绝经后体内雌激素水平急剧下降所致的骨代谢失衡。由于雌激素长期应用可能带来心血管、乳腺癌等风险,作为雌激素的安全替代物,植物雌激素防治绝经后骨质疏松正受到关注。有研究发现雌激素调节骨代谢效应可能由Vit D受体所介导,但植物雌激素的骨代谢调节效应是否与维生素D受体(VDR)有关未见报道。本研究拟从细胞和流行病学角度初探植物雌激素调节骨代谢是否涉及VDR。方法:用不同浓度的金雀异黄酮(Genistein,GEN)作用于MC3T3-E1细胞,采用MTT比色法检测细胞增殖率,观察VDR受体阻断剂ZK159222对GEN效应的影响。MC3T3-E1细胞中加入GEN后,采用Western blotting法检测VDR蛋白的表达情况,加入雌激素受体α阻断剂MPP,雌激素受体β阻断剂PHTPP后观察是否取消GEN调节VDR蛋白效应。对前期流行病学调查300例南昌市绝经后妇女血液样本提取DNA,观察各样本VDR基因Apa I和Bsm I限制性片段长度多态性,结合膳食调查和骨密度检查结果进行分析。观察在不同VDR基因多态性时膳食中植物雌激素与骨密度的关联性。结果:10-8M的GEN可促进MC3T3-E1细胞增殖(p<0.05),该作用可被VDR阻断剂ZK159222所取消,10-8M的GEN可上调MC3T3-E1细胞VDR蛋白表达(p<0.05),MPP和PHTPP不能取消该效应。对VDR限制性酶切位点Apa I和Bsm I基因型分析发现,不同基因型样本的各部位BMD无显著差异(p>0.05),且不同基因型样本膳食植物雌激素摄入量与各部位BMD无明显关联(p>0.05)。结论:1.VDR可介导金雀异黄酮(GEN)促进MC3T3-E1细胞增殖效应。2.GEN上调VDR蛋白表达不是由雌激素受体所介导。3.南昌市绝经后妇女VDR基因多态性与各部位骨密度无关,与膳食植物雌激素摄入的骨代谢效应无关。
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