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猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproductire and respiratory syndrome, PRRS)是猪的一种重要传染病。目前用于预防PRRS的疫苗有弱毒疫苗和灭活疫苗，但免疫效力均不够稳定，而且弱毒疫苗存在反祖危险，灭活疫苗诱导产生的抗体水平很低，且不稳定。PRRSV基因工程苗是目前研究的热点之一。PRRSV的中和表位主要位于GP5蛋白上。M蛋白是欧美毒株间最保守的结构蛋白，也具有中和表位，并与GP5蛋白形成异源二聚体，此二聚体可能对GP5蛋白的转运、加工和成熟有关。同时，GP5和M蛋白也可引起细胞免疫。腺病毒载体已被广泛用于研制人类和各种动物基因工程疫苗。为了研制PRRSV基因工程疫苗，本实验室构建了能稳定表达PRRSV GP5和M蛋白的重组腺病毒rAd-GP5和rAd-M。接种小鼠可诱导产生PRRSV特异性ELISA抗体和中和抗体。本研究则将这两种重组腺病毒接种猪体，对其安全性进行评估，并测定其免疫保护效力。 (1) 安全性评估： 将12头约30日龄PRRSV阴性断奶健康仔猪随机分为3组，隔离饲养，每组4头。一组接种表达猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)GP5蛋白重组腺病毒(rAd-GP5)，另一组接种表达猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)M蛋白重组腺病毒(rAd-M)，另外一组作为空白对照组。隔离饲养，观察临床症状，测量体温。定期采集血清、鼻拭子、粪便和猪圈泥土，用PCR方法检测重组腺病毒和野生型腺病毒的病毒血症和排毒情况。结果为仔猪接种重组腺病毒后精神、食欲正常；2周内体温与空白对照组没有明显差异；猪血清、鼻拭子、粪便和猪舍环境中重组腺病毒及其野生型腺病毒检测均为阴性，表明这两种重组腺病毒对猪体具有很好的安全性。按《农业转基因生物安全评价管理办法》，这两种重组腺病毒生物安全性属Ⅰ级。 (2) 免疫效力测定： 将35头约30日龄PRRSV阴性断奶健康仔猪随机分为5组，隔离饲养，每组4头。其中一组为空白对照组，其它四组分别接种rhd-GP5、rAd-M、rAd-GP5／rAd-M(V／V=1混和病毒液)和PRRSV-Resp弱毒株。此后3个月内，不同时间检测PRRSV特异性抗体。结果为免疫后14和45 d分别可检出PRRSV ELISA抗体和中和抗体；免疫后60d，3个腺病毒免疫组ELISA抗体滴度均达1∶2400以上，与PRRSV-Resp弱毒免疫组相似：