【摘 要】
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该文主要研究谷子质体ACCase基因功能域的原核表达,包括PCR扩增ACCase基因3个功能域BCCP、BC、CT,扩增大小分别是1600bp、1800bp、20 00bp;将3个片段分别构建到原核表达载体P
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该文主要研究谷子质体ACCase基因功能域的原核表达,包括PCR扩增ACCase基因3个功能域BCCP、BC、CT,扩增大小分别是1600bp、1800bp、20 00bp;将3个片段分别构建到原核表达载体PQE30上,进行酶切、PCR鉴定、测序鉴定后,用IPTG做原核诱导表达,纯化目的蛋白.结果三个片段均构建成功,测序结果正确,诱导表达后BC片段有66KD的目的条带,纯化后得到单一条带;与对照相比BCCP、CT没有诱导出明显目的条带.目前,国内外对ACCase的研究主要将抗除草剂的基因导入农作物,通过常规育种或组织培养获得抗除草剂的作物新品系,或者从细胞遗传学及育种角度进行了研究,其它方面未见报道,对于该基因在植物体内的抗性机理及这3个功能域的特性了解更少.该实验弥补了对ACCase基因及其功能域在蛋白水平上研究的不足,为今后研究该基因3个功能域的生物活性、ACCase抗性机理,以及在生产上应用于其它农作物奠定基础.
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