【摘 要】
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Rasfonin是从真菌次级代谢产物中提取出来具有显著肿瘤抑制作用的一种化合物，初步的研究表明rasfonin可以引起细胞发生凋亡，但是对于rasfonin在细胞自噬和其引起自噬和凋亡的关
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Rasfonin是从真菌次级代谢产物中提取出来具有显著肿瘤抑制作用的一种化合物，初步的研究表明rasfonin可以引起细胞发生凋亡，但是对于rasfonin在细胞自噬和其引起自噬和凋亡的关系中发挥的作用并没有深入的研究，同时对于Akt正调节自噬的机理有待进一步探究。在我们的研究中，发现rasfonin可以诱导自噬体的形成，促进LC3-Ⅱ的积累和自噬底物p62(SQSTM1)的降解，同时伴随着上调Akt的磷酸化。利用化学小分子抑制剂或通过siRNA干扰敲降Akt的表达都可以部分抑制rasfonin引起的自噬和凋亡。过量表达活化的Akt促进该化合物引起的PARP-1的切割，而对rasfonin引起自噬的调节表现出细胞和时间依赖的特点，并与特定的Akt亚型相关。实时定量PCR以及蛋白免疫印迹结果表明，rasfonin可以在mRNA和蛋白水平增加糖酵解基因的表达;而Akt的抑制剂减少了该化合物诱导的这些基因表达。2-DG，是HK2(hexokinaseⅡ)的抑制剂，我们发现2-DG可以减少rasfonin引起的自噬和凋亡，而PFKFB3(6-phosphofructo-2-kinase)的抑制剂则可以更大程度上抑制rasfonin引起的自噬，但却促进其诱导的PARP-1的切割。通过siRNA干扰敲降HK2或是PFKFB3都可以抑制rasfonin引起的自噬。因此我们推测Akt可能通过糖酵解途径正调节rasfonin引起的自噬和凋亡。
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