第一部分托吡酯对慢性癫痫幼鼠海马神经元损伤的影响[目的]探讨托吡酯(TPM)低、中、高不同剂量对幼鼠慢性癫痫发作引起的海马神经元损伤的影响。[方法]将60只3周龄雄性Wistar大鼠随机分为5组,每组12只:阴性对照组(A组)、阳性对照组(B组)、TPM低剂量组(C组)、TPM中剂量组(D组)、TPM高剂量组(E组)。B、C、D、E四组先行戊四氮(PTZ)腹腔注射制造幼鼠慢性癫痫模型,再分别给予蒸馏水、TPM 20、40、80 mg / ( kg. d )灌胃;A组则先行生理盐水腹腔注射,再给予蒸馏水灌胃。连续用药2个月。观察各组幼鼠行为学表现、血清神经元特异性烯醇化酶( NSE )及海马区病理改变。[结果]1.对幼鼠体重的影响A组与B组幼鼠体重增长差异无统计学意义;C、D、E三组幼鼠体重增长较A、B两组为慢(均P < 0.001),且E组慢于C、D两组(均P < 0.001),C组与D组差异无统计学意义。2.对幼鼠行为的影响A组幼鼠无惊厥发作,B、C、D、E四组幼鼠在PTZ腹腔注射后均出现不同程度的惊厥发作。B、C、D、E组的惊厥发作次数依次为:( 48.4±3.7 )、( 44.7±2.9 )、( 44.3±3.1 )、( 42.7±3.2 )次。与B组比较,C、D、E三组均有统计学意义(P < 0.05或P < 0.01 ),但C、D、E三组之间差异无统计学意义。3.对幼鼠血清NSE水平的影响A、B、C、D、E五组幼鼠血清NSE值依次为:(18.717±2.954)μg/L、(35.713±5.974)μg/L、(27.402±6.401 )μg/L、(24.791±6.221)μg/L、(21.473±6.875)μg/L。与A组相比,C、D两组差异有统计学意义(均P < 0.01), E组差异无统计学意义;与B组相比,C、D、E三组差异均有统计学意义(均P < 0.05);但C、D、E三组相互比较,差异无统计学意义。4.对幼鼠海马神经元形态学的影响A组海马区罕见神经元损伤;B组出现明显神经元变性、死亡,胶质细胞增生和嗜神经现象;C、D、E三组亦可见神经元变性、坏死,胶质细胞增生,但较A组明显减少。A、B、C、D、E五组幼鼠海马CA3区坏死神经元细胞百分比依次为:(5.8±1.9)%、(72.2±9.8)%、(43.9±7.1)%、(25.9±5.5)%、(10.5±4.2)%;海马CA1区坏死神经元细胞百分比依次为:(5.1±1.8) %、(65.6±8.1)%、(40.5±6.4)%、(23.1±5.2)%、(8.9±3.6)%;五组间差异有统计学意义(CA3区P < 0.001;CA1区P < 0.001)。[结论]TPM对幼鼠慢性癫痫发作引起的脑神经元损伤具有保护作用,且20、40、80 mg / ( kg. d )三剂量之间存在剂量效应, 80 mg/(kg. d)剂量神经元保护作用最强。第二部分托吡酯联用叶酸对慢性癫痫幼鼠海马神经元损伤的影响[目的]探讨托吡酯(TPM)联用叶酸(FA)对慢性癫痫幼鼠海马神经元损伤的影响。[方法]将48只3周龄雄性Wistar大鼠随机分为阴性对照组、阳性对照组、TPM组、TPM + FA组,每组12只。阳性对照组、TPM组和TPM + FA组先行戊四氮(PTZ)腹腔注射制造幼鼠慢性癫痫模型,再分别给予蒸馏水、TPM 40mg / ( kg. d )和TPM 40 mg/ (kg.d) + FA 5 mg/ (kg.d)灌胃;阴性对照组则先行生理盐水腹腔注射,再给予蒸馏水灌胃。连续用药2个月。观察各组幼鼠行为学表现、血清神经元特异性烯醇化酶( NSE )及海马区病理改变。[结果]1.对幼鼠行为的影响1.1阴性对照组幼鼠无惊厥发作,阳性对照组、TPM组和TPM + FA组幼鼠的惊厥发作次数依次为:(48.4±3.7)次、(44.3±3.1)次、(43.1±3 .7)次。与阳性对照组相比,TPM组和TPM + FA组差异均有统计学意义(均P < 0.05),但TPM组和TPM + FA组两组相比,差异无统计学意义。1.2水迷宫学习记忆能力测试:阴性对照组、阳性对照组、TPM组和TPM + FA组幼鼠学会正确上台所需的训练次数依次为: (6.9±2.3)次、(9.3±2.6)次、(12.6±3.4)次、(8.4±2.7)次。与TPM组相比,阴性对照组、阳性对照组和TPM + FA组差异均有统计学意义(P < 0.001或<0.05)。2.对幼鼠血清NSE水平的影响阴性对照组、阳性对照组、TPM组和TPM + FA组幼鼠血清NSE值依次为:(18.717±2.954)μg/L、(35.713±5.974)μg/L、(24.791±6.221)μg/L、(22.550±7.019)μg/L。与阴性对照组相比, TPM组差异有统计学意义(P < 0.01),TPM + FA组差异无统计学意义;与阳性对照组相比,TPM组和TPM + FA组差异均有统计学意义(均P < 0.01);TPM组和TPM + FA组两组相比,差异无统计学意义。3.对幼鼠海马神经元形态学的影响3.1光镜下:阴性对照组、阳性对照组、TPM组和TPM + FA组幼鼠海马CA3区坏死神经元细胞百分比依次为:(5.8±1.9) %、(72.2±9.8) %、(25.9±5.5) %、(16.1±4.8) %,海马CA1区坏死神经元细胞百分比依次为:(5.1±1.8) %、(65.6±8.1)%、(23.1±5.2) %、(14.9±4.3) %;四组差异有统计学意义(P <0.01或<0.001)。3.2电镜下:阴性对照组海马神经元细胞边界清楚,核膜完整,线粒体内外膜清楚,短嵴清晰。阳性对照组、TPM组和TPM + FA组均可见部分海马神经元细胞核固缩,线粒体明显肿胀,嵴断裂或消失,有些空泡化,外膜破裂。阴性对照组、阳性对照组、TPM组和TPM + FA组幼鼠海马CA3区神经元线粒体的超微结构损伤程度依次为:(0.34±0.09)级、(3.76±0.28)级、(2.85±0.21)级、(2.09±0.31)级,四组间差异有统计学意义(P < 0.01)。[结论]TPM对慢性癫痫发作所致的海马神经元损伤有保护作用, FA可加强TPM的保护作用。