蓝萼香茶菜二萜类物质抗凝血作用机制的研究

来源 :大连医科大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:DragonDoor
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目的:通过对蓝萼香茶菜中二萜类物质含量及蓝萼甲素含量的测定筛选提取工艺,确定最佳提取工艺,考察蓝萼香茶菜中二萜类物质抗凝血作用机制。方法:以冬凌草甲素为对照品。采用紫外分光光度法测定,根据蓝萼香茶菜二萜类物质含量筛选提取工艺。采用RP-HPLC法测定蓝萼香茶菜中蓝萼甲素含量。采用急性毒性实验,测定小鼠对总二萜的LD50。通过测定小鼠的毛细管凝血时间和尾尖出血时间;大鼠的凝血酶时间(TT)、凝血酶原时间(PT)活化部分凝血激酶时间(APTT)和血浆复钙时间(PRT),考察蓝萼香茶菜二萜类物质体内抗凝血作用机制。通过花生四烯酸(AA)和ADP诱导的血小板聚集试验,测定二萜类物质蓝萼甲素对新西兰兔体外血小板致聚的作用。结果:加热回流方法提取蓝萼香茶菜总二萜最多,每克生药中总二萜毫克含量为20.782mg·g-1,综合考虑提取方法的提取效率、毒性、成本、灌胃性状等因素,提取方法最佳的是加热回流法;小鼠灌胃给药LD50为1.090mg·kg-1,最佳实验剂量应小于0.25mg·kg-1;蓝萼香茶菜总二萜高、中、低剂量能延长小鼠的出血时间,延长百分率分别为88.5%、62.3%、22.3%;而且能延长小鼠的凝血时间,延长百分率分别为96.5%,76.8%,42.8%;并且显著延长大鼠TT、APTT和PRT。蓝萼甲素能有效抑制AA作用的血小板聚集,抑制作用与剂量的二次方成正比,当浓度大于0.01mg·mL-1时能完全抑制血小板聚集;蓝萼甲素能有效抑制ADP作用的血小板聚集,抑制作用与剂量的三次方成正比,当浓度大于2mg·mL-1时能完全抑制血小板聚集。结论:蓝萼香茶菜二萜类物质有抗凝血作用。
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