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光电化学过程是指光电活性物质在吸收一定频率的光子后,发生电荷转移,进而产生电流或电压的过程。光电化学的研究内容,就是研究在电磁辐射(主要是可见光、紫外光)作用下,各种电极上所发生的电化学过程。光电化学传感器是利用光电活性物质来检测待测物的传感装置。若待测物与电极上的光电活性物质能够产生物理化学作用,则传感器的光电流或者光电压会发生变化,而光电流或光电压的变化与待测物浓度存在一定的关系,因而可以通过测定光电流或光电压的变化来检测待测物浓度,这就是光电化学传感器的工作原理。 光电化学传感器根据测量物理量不同,可分为电位型传感器和电流型传感器,而电流型传感器又可分为光电淬灭型和光电增强型传感器两种。光电活性材料根据材料性质主要分为无机和有机光电材料两种,其中,纳米半导体无机材料因为量子尺寸效应、表面效应等原因具有比本体材料更优越的光电性质,成为光电材料研究领域的热点。TiO2纳米材料具有大的比表面积,高的表面吸附能力以及良好的稳定性等优点,而它的主要缺点是只能在紫外光下激发,且光生空穴氧化性过强,不能直接用于细胞分析。使用卟啉及其衍生物敏化后的TiO2,光电效率大幅提高,且能在可见光下激发,能够很好的应用于细胞分析。本文制备了基于纳米TiO2和卟啉衍生物为基底光电活性物质,3-氨基苯硼酸(APBA)为唾液酸探针和细胞捕获剂的光电化学传感器,实现了对细胞的测定。主要内容如下: 1.基于TiO2-TPPTA-APBA基底的能够特异性识别唾液酸的细胞光电化学传感器的研制 设计了一种以纳米TiO2与卟啉衍生物TPPTA为基底光电活性物质,3-氨基苯硼酸(APBA)为唾液酸探针和细胞捕获剂的细胞光电化学传感器。复合材料中的TPPTA一方面降低了TiO2的禁带宽度,最小激发波长红移至可见光范围,减小了空穴-电子对的复合几率,大幅提高了光电流强度和灵敏度;另一方面,利用缩合试剂EDC,能够将TPPTA上的羧基与APBA上的氨基反应,使APBA连接到传感器上。然后利用生理条件下,APBA与唾液酸的特异性结合,测定细胞的状态和数量。实验证明,光电流差值与HL-60细胞的浓度的对数成线性关系,其原因是细胞与传感器的结合阻碍了溶液中电子供体(抗坏血酸)向传感器的电子传递。其检测范围为1.0×102到1.0×106 cells/mL,检测限为1.0×102cells/mL。此方法细胞捕获效果很好,检测限较低。另外在唾液酸酶条件实验中,利用唾液酸酶去掉细胞表面的唾液酸残基后,APBA捕获细胞的能力大幅减弱,也证明了APBA确实是和细胞表面的唾液酸产生了特异性结合。 2.以HP-MWCNT为光电活性物,纳米Au修饰活细胞的光电增强型细胞传感器的初步研究 介绍了一种新型的光电流增强型细胞光电化学传感系统。电极为ITO,传感器基底为壳聚糖(CS)。首先将HL-60细胞用金纳米粒子修饰,然后利用ITO/CS膜捕获具有光电流信号放大作用的纳米Au修饰的HL-60细胞,最后通过3-氨基苯硼酸(APBA)将光电活性的血卟啉(HP)-多壁碳纳米管(MWCNT)复合物与细胞结合。纳米Au修饰的细胞,其本身光电性能大幅增强,细胞对传感器体系的阻碍作用小于其促进作用,因此细胞数量越多,光电流越强,初步探索了其作为增强型细胞光电化学传感器的可能。