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本文采用高效液相色谱-串联质谱法检测鸡血浆和组织中的沃尼妙林(Valnemulin),并进行了沃尼妙林在鸡体内的药动学和组织中残留消除规律的研究。
30只健康鸡,随机分为3组,按10mg/kg b.w.剂量(以沃尼妙林计)分别进行静注、肌注及口服盐酸沃尼妙林的药动学试验。采用高效液相色谱-串联电喷雾质谱法测定血浆中沃尼妙林的浓度。应用WinNonlin药动学软件的统计矩原理处理血浆药物浓度-时间数据。血浆中的药物经乙腈提取,血药浓度在0.01~5μg/mL范围内线性关系良好。在0.01、l、5μg/mL三个添加水平的回收率为85.5%~101%,批内变异系数1.5%~4.4%,批间变异系数4.1%~5.0%。检测限为5 ng/mL,定量限为10ng/mL。主要药动学参数分别为:(1)单剂量静注沃尼妙林:C04.26±0.21μg/mL,t1/2β2.21±0.30h,AUC9.23±0.58μg·h/mL,MRT2.45±0.20h,ClB1.22±0.06 L/h/kg,Vz3.41±0.37 L/kg,Vss2.66±0.14 L/kg;(2)单剂量肌注沃尼妙林:Tpeak0.43±0.04h,Cmax2.23±0.09μg/mL,t1/2β6.15±0.40h,AUC8.70±0.28μg·h/mL,MRT6.31±0.27h,F94.26%;(3)单剂量口服沃尼妙林:Tpeak(1)1.38±0.21h,Cmax(1)0.81±0.08μg/mL,Tpeak(2)4.89±0.46h,Cmax(2)0.56±0.09μg/mL,t1/2β6.70±0.63h,AUC6.12±0.67μg·h/mL,MRT9.16±0.71h,F66.31%。
36只健康鸡随机分为6组,空白组6只,其余为给药组。按10mg/kg b.w.剂量(以沃尼妙林计)胃管灌服盐酸沃尼妙林,连续给药7天。停药后在第4、12、24、48、72、96h,分别采取颈静脉放血,处死6只鸡,取皮脂,肌肉、肾脏、肝脏和肺脏进行组织残留消除规律研究。组织样品匀浆后,经乙腈提取,Strata-X-C固相萃取小柱净化,浓缩后定容,上机测定。沃尼妙林在各组织中低、中、高(20、100、500μg/kg)三个浓度的平均回收率为75.1%~104%,批内变异系数为1.2%~9.8%,批间变异系数为3.1%~13.2%。组织中最低检测限为2μg/kg。沃尼妙林在鸡组织中的药时数据用统计矩原理进行处理。各组织的主要消除动力参数分别为:(1)皮肤+脂肪:β0.18h-1,t1/2β3.83h,AUC1.93μg·h/g,AUMC7.73μg·h2/g,MRT4.00h:(2)肌肉:β0.15h-l,t1/2β4.64h,AUC0.50μg-h/g,AUMC2.78μg·h2/g,MRT5.55h;(3)肾脏:β0.081h-1,t1/2B8.57h,AUC25.55μg·h/g,AUMC78.36μg·h2/g,MRT3.07h;(4)肝脏:β0.13h-1,t1/2β5.51h,AUC35.76μg·h/g,AUMC213.18μg·h2/g,MRT5.80h;(5)肺脏:β0.096h-1,t1/2β7.26h,AUC168.42μg·h/g,AUMC1823.54μg-h2/g,MRT10.83h。
试验结果表明,沃尼妙林在鸡体内的药动学特征:吸收迅速,体内分布广泛,可在深部组织蓄积,生物利用度较高。口服给药药时曲线出现双峰现象,血药浓度较低,但有效血药浓度维持时间长。残留试验结果显示,沃尼妙林在鸡各组织中的残留分布不均,在组织分布中广泛,尤其是肺脏,含量最高,是药物作用的靶器官。各组织在4~12h之间消除迅速。沃尼妙林残留浓度大小顺序:肺>肝>肾>皮脂>肌肉。
目前关于沃尼妙林在鸡组织中的残留限量(MRLs)还没有明确的规定,根据EMEA最新标准,以沃尼妙林在其他动物组织中的MRLs为依据,采用“WTl.4”软件对沃尼妙林在鸡应用的休药期进行估算,并根据沃尼妙林在鸡体内的药物动力学特征和组织中的残留消除特点,建议休药期为2d。