差异显示法分析雌二醇对巨噬细胞基因表达的影响

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目的:利用差异显示法,分析生理浓度下雌二醇对小鼠骨髓巨噬细胞基因表达的影响。 方法:选用三周龄雄鼠(C57BL/6j),分离股骨骨髓,实验组给予生理浓度雌二醇10nM(溶于无水乙醇),对照组给予等体积的无水乙醇,终浓度为0.04%,在巨噬细胞激落刺激因子(M-CSF)作用下,使骨髓细胞分化成熟为巨噬细胞。采用差异显示(DD-PCR)法,对差异基因片段进行扩增、回收、纯化、克隆、序列测定及同源性检索分析,并根据已知基因序列合成引物,进行RT-PCR再证实。 结果:差异基因片段经序列测定及同源性分析,由实验组克隆到一个新基因,由对照组克隆到ankyrin-1基因。合成两对引物,分别由实验组和对照组扩增到相应产物。 结论:雌激素作用组与对照组间基因表达情况发生改变,这可能与生理浓度的雌激素的作用有关。
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