【摘 要】
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目的:检测γ-氨基丁酸A型受体β3亚基(Gamma-aminobutyric acid type A receptor beta3 subunit,GABRB3)在环境污染物2,3,7,8-四氯二苯并二噁英(2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin,TCDD)诱导C57BL/6J胎鼠腭裂模型中的表达情况,探究GABRB3与TCDD诱导的先天性腭裂的关系。方法:将60只
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目的:检测γ-氨基丁酸A型受体β3亚基(Gamma-aminobutyric acid type A receptor beta3 subunit,GABRB3)在环境污染物2,3,7,8-四氯二苯并二噁英(2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin,TCDD)诱导C57BL/6J胎鼠腭裂模型中的表达情况,探究GABRB3与TCDD诱导的先天性腭裂的关系。方法:将60只C57BL/6J孕鼠按照随机数字表法分为实验组和对照组,每组30只。妊娠第10.5天(Gestation Day10.5,GD10.5)实验组以28μg/kg剂量的TCDD单次灌胃,对照组以5.6ml/kg剂量的玉米油单次灌胃。分别在GD13.5、GD14.5、GD15.5、GD16.5、GD17.5进行胎鼠腭部大体形态学和组织学观察;应用Q-PCR和Western Blot技术检测GABRB3在不同妊娠时期的胎鼠腭组织中mRNA和蛋白的表达水平;免疫组织化学法和免疫荧光法检测GABRB3蛋白在腭组织上的表达定位。结果:实验组共获164只活胎鼠,均发生腭裂(100%);对照组共获188只活胎鼠,均无腭裂发生(0%)。较对照组相比,实验组胎鼠腭架上抬延迟1天。GD14.5、GD15.5、GD16.5、GD17.5实验组中GABRB3的mRNA和蛋白相对表达量均显著低于对照组(P<0.05)。对照组GD14.5、GD15.5、GD16.5、GD17.5中GABRB3的mRNA和蛋白相对表达量显著高于该组GD13.5(P<0.05),实验组GD15.5、GD16.5中GABRB3的mRNA和蛋白相对表达量显著高于该组GD13.5、GD14.5(P<0.05)。免疫组织化学和免疫荧光结果显示,GABRB3主要表达于腭突间质细胞和腭突中嵴上皮缝。结论:采用28μg/kg剂量的TCDD成功建立了C57BL/6J胚胎鼠腭裂模型,证实了TCDD诱导腭裂的高效性和稳定性。TCDD诱导胎鼠腭架上抬延迟并最终导致腭裂发生可能与GABRB3表达降低有关;GABRB3可能在腭部发育的上抬和融合过程中发挥重要作用。
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