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目的:探究在肝细胞肝癌中circSP3的表达、作用以及circSP3通过作为miR-198海绵调节CDK4的表达从而促进肝细胞癌的增殖、迁移和侵袭的相关机制。方法:采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)实验检测circSP3在肝细胞癌患者癌组织和癌旁肝组织中的表达水平,此外检测4种肝癌细胞(Hep-3B、Huh7、Bel-7402、SMMC-7721)和正常肝细胞(HL-77O2)中的表达水平。使用质粒转染以及慢病毒感染Hep-3B和Huh-7细胞,从而筛选得到过表达以及敲低circSP3表达的肝癌细胞株。同时采用CCK-8实验,Transwell迁移实验和Transwell侵袭实验分别检测circSP3对肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。采用裸鼠成瘤实验来验证circSP3在体内对细胞增殖活性的影响。然后使用生物信息学分析,qRT-PCR,双荧光素酶测定和蛋白质印迹分析circSP3,miR-198和CDK4之间的关系。之后的救援实验验证circSP3通过作为miR-198海绵调节CDK4的表达从而促进肝细胞癌的增殖、迁移和侵袭。结果:qRT-PCR结果表明,相比与癌旁肝组织和正常肝细胞,肝癌组织(P<0.001)和4种肝癌细胞Hep-3B、Huh7、Bel-7402、SMMC-7721(P<0.05,P<0.001,P<0.001和P<0.001)中circSP3的表达明显增高。卡方检验结果显示:circSP3的表达量与肿瘤大小(P<0.001),TNM分期(P<0.01)高度相关。质粒转染后,circSP3组细胞中circSP3的表达水平明显增强(P<0.001),si-circSP3-2组细胞中circSP3的表达水平明显降低(P<0.001),在被慢病毒感染后,LV3-circSP3组细胞中circSP3的表达水平明显降低(P<0.01)。CCK-8增殖实验结果表明:circSP3组细胞增殖活性较NC组明显增强,在72小时最明显(P<0.05);相反,si-circSP3-2组细胞增殖活性较si-NC组显著减弱,在48小时(P<0.05)和72小时(P<0.01)均较为明显。Transwell迁移和侵袭实验结果表明与NC组细胞相比circSP3组细胞迁移(P<0.01)和侵袭(P<0.01)细胞个数显著增加;相反,与si-NC组细胞相比较si-circSP3-2组细胞的迁移(P<0.01)和侵袭(P<0.01)细胞个数显著减少。裸鼠成瘤实验表明与LV3-NC组相比LV3-circSP3组小鼠肿瘤的生长速度较为缓慢且肿瘤体积(P<0.05,P<0.01)和重量(P<0.05,P<0.001)明显减小。随后,采用qRT-PCR检测正常肝细胞和肝癌细胞中miR-198的表达水平。发现肝癌细胞(P<0.001,P<0.001,P<0.001和P<0.001)中miR-198的表达相比较正常肝组织和正常肝细胞有明显降低。然后通过相关性分析发现miR-198和circSP3的表达水平呈负相关(r=-0.2524)。qRT-PCR结果显示,circSP3组细胞中miR-198的表达低(P<0.001),si-circSP3组细胞中miR-198的表达增加(P<0.001);miR-198 mimic组细胞中circSP3的表达降低(P<0.001),mi-198 inhibitor组细胞中circSP3的表达增加(P<0.001)。双荧光素酶测定实验结果表明,miR-198mimic能够显著减弱circSP3-wt组中细胞的荧光活性(P<0.01,P<0.001),而miR-198 contorl对circSP3-wt组中细胞的荧光活性没有影响。qRT-PCR和Westorn blot结果显示:miR-198 mimic逆转了过表达circSP3对CDK4的促进作用(P<0.01和P<0.001),mi-198 inhibitor逆转了敲低circSP3对CDK4的抑制作用(P<0.01和P<0.001)。并且救援实验结果显示,miR-198 mimic能够逆转过表达circSP3对Hep3B细胞增殖、迁移和侵袭的促进作用(P<0.01),mi-198 inhibitor逆转了敲低circSP3对Huh-7细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用(P<0.05)。结论:肝癌细胞和肝细胞癌组织中circSP3的表达量增加。circSP3的表达量与肿瘤大小,TNM分期相关。circSP3可促进增殖、迁移和侵袭。circSP3的表达水平和miR-198的表达水平呈负相关,circSP3可以通过作为miR-198的海绵进而对miR-198的下游靶基因CDK4进行调节。circSP3可能是肝细胞癌中重要的生物标志物和治疗靶点,值得继续深入研究。