【摘 要】
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用乙醛对基因重组人类神经htau40进行醛胺化,再用NCLK和[γ-P]ATP对其磷酸化.磷酸化后的产物经胰蛋白酶降解,用HPLC分析降解后的磷酸化片段,发现醛胺化tau的降解物中有两个新
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用乙醛对基因重组人类神经htau40进行醛胺化,再用NCLK和[γ<32>-P]ATP对其磷酸化.磷酸化后的产物经胰蛋白酶降解,用HPLC分析降解后的磷酸化片段,发现醛胺化tau的降解物中有两个新的磷酸化肽段(A4和A6),它们分别在35和49分钟从碳-18反向柱上被乙氰(浓度梯度)洗脱出来.采用升高温度和盐酸胍的变性手段,研究人类神经tau对三磷酸甘油醛脱氢酶变性失活及荧光参数的影响.发现tau能促进GAPDH变性失活,并伴有荧光参数改变.采用了htau40研究GAPDH在复性过程中活力和荧光参数的变化.通过对GuHCl溶液进行稀释从而使GAPDH复性,tau能抑制该酶的复活,并促进其在复性过程中的聚集.但是,当tau分子聚集或被NCLK磷酸化,抑制GAPDH复活和促进聚集的作用会丧失.结果提示,tau对于GAPDH可能具有反分子伴侣的作用,并且这种作用与其构象有关.
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